• Forum - Biologie, Extraction, Purification des protéines

[Biologie végétale] Extraction et purification des proteines à partir du fruit de la rosa canina

[Biologie végétale] Extraction et purification des proteines à partir du fruit de la rosa canina.  [...] Je cherche une méthode d'analyse qui me permettra en premier lieu d'extraire et de purifier les protéines totales du fruit de la Rosa canina.  [...]

Méthodes d'extraction et de purification des protéines recombinées

On dit protéine recombinante. Tu auras plus de réponses sur le forum biologie. En attendant. http.//fr.wikipedia.org/wiki/Purification_de_protéines.  [...] tu as deu méthodes d'extractions. non dénaturante (qui permet de maintenir l'activité de l'enzyme), dénaturante (si tu n'as pas besoin de conserver l'activité de la protéine).  [...]

Na-bisulfite (NAHSO3) , rôle ???

Je ne l'ai jamais utilise dans le cas d'extraction d'ADN, mais dans le cas de purification/extraction de proteines. Il agirait comme anti-oxydant.  [...] Merci beaucoup pour votre réponse rapide... En effet, c'était bien pour l'extraction et la purification de proteines et non de l'ADN, désolé pour l'erreur.  [...]

biotechnologie

Chers collègues utilisateurs je cherche des exercices corrigés sur l'extraction et purification de protéines.  [...]

[Biochimie] Comment désagréger des protéines recombinantes?

[Biochimie] Comment désagréger des protéines recombinantes.  [...] Comment désagréger des protéines recombinantes La protéine est produite dans E.coli puis je procède à une extraction protéique, une purification IMAC et un dessalage. Enfin, je la filtre à 0.2um avant de la tester sur cellules mais la protéine d'intêret forme des agrégats après quelques jours de conservations à 4°C ce qui m'oblige à relancer des campagnes de production.  [...]

[Biochimie] Trypsine ou Pronase

J'ai un TP de biochimie à faire où on doit purifier de l'ADN et à une certaine étape, on ajoute de la pronase à l'ADN pour briser les peptides en solution. Par la suite, on fait une extraction au phénol/chloroforme pour enlever les protéines et lipides de la solution contenant l'ADN. Alors, j'aimerais savoir.  [...] 1. Si on utilise de la trypsine au lieu de le pronase, cela fait en sorte que les protéines sont hydrolysées en de moins petits fragments. Ma question est. quel impact le fait d'avoir des fragments de protéine plus gros a sur le reste de la purification Est-ce que l'extraction au phénol/chloroforme sera moins efficace Si oui pourquoi.  [...]

Purification et extraction des protéines....

Je vous explique ma situation, je suis en deuxieme année de biologie, et j'ai une matière ou je dois crée moi même mon TP de A a Z avec un sujet définit, mon sujet est Purification et caractérisation des propriétés de réduction des ponts disulfures de la protéine DsbA de la bactérie Neisseria meningitidis, le sujet fais plus peur qu'autre chose, mais bon.  [...] A la suite de ce WB j'effectue une purification par chromatographie d'affinité sur colonne Ni- NTA, mais je ne sais pas qu'elle volume de protéine mettre dans la colonne.  [...]

Antigène

Les protéines recombinantes ne sont donc pas extraite de la nature mais synthétisées en laboratoire. Pour te donner un exemple que j'ai expérimenté, moi en thèse je travaillais sur la protéine d'un parasite très pénible à cultiver. J'aurais jamais pu cultiver assez de parasites pour ensuite faire 50 étapes d'extraction/purification pour arriver à un excellent taux en ma protéine d'intérêt dans mon échantillon, et en quantités acceptables pour mes manips.  [...] Du coup, j'ai fait exprimer ma protéine d'intérêt à une bactérie (E. coli). elle se cultive très facilement et je peux lui faire produire ma protéine en très grande quantité. C'est ce qu'on appelle le clonage moléculaire. Grâce à la transgenèse. Après expression de la protéine, je dois la purifier pour me débarrasser de tout ce qui appartient à la bactérie et me retrouver avec un taux idéalement avoisinant 100% de ma protéine d'intérêt.  [...]

[Biologie Moléculaire] Purification Protéines Tag 6His

2) J'ai fait un suivi de la protéine en prenant des aliquots à chaque étape de purif. Je retrouve ma protéine dans le surnageant, des traces minimes dans les lavages et elle est à la bonne taille. En revanche la fraction purifiée (éluat) donne une bande légèrement en dessous des autres.  [...] N'aurais tu pas une modification post traductionnelle de ta protéine ou un clivage d'une region leader par expl Car il est peu probable que ta protéine courte existe dans ton eluat vu les différences d'intensité des bandes et que la bande de bas poid n'est pas du tout visible, alors qu'elle represente quasiement toute les proteines apres élution.  [...]

[Biochimie] Purification des proteines Linases dans la levure

je suis en etudiante en biologie et je prepare actuellement ma licence. Le theme sur lequel je travaille est la purification des proteines kinases (proteine Kinase A) dans la levure.  [...] Concernant la purification dans la levure je suis a la recherche de protokolle, website, skript...ou je pourrai trouver un procede detaille, car je suis jusque la en train d essayer differantes solutions (par ex. washbuffer et Runningsbuffer contenant de l histidin ou alors du KPO4, du NaCl.  [...]