• Forum - Biologie, Extraction, Protéines

[Biologie Moléculaire] Resolubilisation des proteines aprés extraction au trizol

Après avoir récupéré la phase rouge contenant l'ADN et les protéines, on a ajouté 300µl d'éthanol 100% pour précipiter l'ADN. Après incubation 3mn, on centrifuge à 4600 tours pendant 5 mn. On prélève la phase aqueuse à laquelle on ajoute 1ml d'isopropanol pour précipiter les protéines.  [...] C'est l'éternel problème des protéines, une fois précipitées elles peuvent le rester...Il existe certaines solution qui impliquent de dénaturer les protéines (urée 8M ou chlorure de guanidium 6M) pour les solubiliser. Plus rare mais parfois très efficace solubiliser dans de l'arginine 1 ou 2 M, ça peut donner des bons résultats.  [...]

[Biologie végétale] Extraction et purification des proteines à partir du fruit de la rosa canina

[Biologie végétale] Extraction et purification des proteines à partir du fruit de la rosa canina.  [...] Je cherche une méthode d'analyse qui me permettra en premier lieu d'extraire et de purifier les protéines totales du fruit de la Rosa canina.  [...]

[Biologie Cellulaire] Extraction proteines nucleaires

J'ai deja fait des extraction de proteines Noyau/cytosol mais mon protocol (qui ne contient pas d'ultracentrifugation) n'est pas tres propre. Dans le sens ou il enrichit les fractions mais celles-ci contiennent des contaminations des autres compartiments.  [...] je purifie des proteines, produitent en systeme procaryote, à l'aide du systeme de bille magnétique en nickel de chez promega. mes proteines sont des prot taggé 6xhis. jaimerai savoir si il est possible de recycler ces bille pour une nouvelle utilisation. merci.  [...]

[Biologie Cellulaire] Extraction de protéine du coeur

Je cherche un protocole pour l'extraction des protéines à partir d'un coeur de rat. Ainsi que quelques détails sur le dosage BCA de Pierce.Merci.  [...] Pour l'extraction, le protocole sera très différent selon que tu souhaites extraire toutes les protéines ou une catégorie seulement... il faudrait plus de précisions.  [...]

[Biologie Cellulaire] Extraction protéique pour western blot

Salut, voilà un petit protocole rapide pour l'extraction des protéines. Attention, vu que tu n'as pas précisé quel est le type de cellules que tu utilises, je te donne celui que j'utilise. extraction de protéines à partir de cellules de mammifères Hela (marche avec pleins d'autres types cellulaires bien évidemment).  [...] Je disais juste ça parce que je me doute que la première fois que tu as fais une extraction prot à partir d'une boite, si tu n'avais pas dosé, tu allais mettre au pif une quantité de protéines. Avec un risque de charger trop (ou pas assez) ton puits.  [...]

Méthodes d'extraction et de purification des protéines recombinées

On dit protéine recombinante. Tu auras plus de réponses sur le forum biologie. En attendant. http.//fr.wikipedia.org/wiki/Purification_de_protéines.  [...] tu as deu méthodes d'extractions. non dénaturante (qui permet de maintenir l'activité de l'enzyme), dénaturante (si tu n'as pas besoin de conserver l'activité de la protéine).  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction protéines pariétales

=. une extraction de protéines pariétales maison afin de réduire le pool protéique mais qui me donne pas assez de protéines.  [...] J'ai une ou deux idées sous le coude. partir sur des volumes d'extraction + importants et précipiter les protéines au TCA tenter un protocole d'extraction des protéines en pH alcalin.  [...]

[Biologie Cellulaire] Western blot + extraction proteine

Alors voila, je cultive des fibroblastes cutanés en flask de 75cm2 sur lequel j'aimerais faire une extraction de proteines totales pour ensuite faire un WB pour pouvoir detecter ma prot d'intêret.  [...] Attention attention, le RIPA est un buffer principallement utilisé pour faire des IP. Si ce sont les protéines totales qui vous intéressent ce n'est pas une extraction en tant que telle qu'il faut faire, il vaut mieux lyser classiquement vos cellules dans du Laemli 1X avec béta-mercapto ou DTT.  [...]

[Biologie Cellulaire] extraction protéique (ERK1/2) à partir de cellules U2OS

[Biologie Cellulaire] extraction protéique (ERK1/2) à partir de cellules U2OS.  [...] Merci c'est très gentil et ta réponse était rapide, effectivement j'ai utilisé une résine talon mais j'ai pas pu avoir cette protéine en blot sachant que je l'ai pas encore eluer.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction protéique/ARN du foie (souris) avec Omni bead Ruptor

[Biologie Moléculaire] Extraction protéique/ARN du foie (souris) avec Omni bead Ruptor.  [...] Je suis assistante ingénieur en Biologie. Nous avons reçu un nouveau Homogéneiseur à billes bead ruptor 12 avec lequel nous voulons réaliser des extractions ARN et proteique sur le foie sauf que nous avons aucune idée du programme et la vitesse qu'il faut utiliser (en gros le protocole de la machine).  [...]