• Forum - Beta, Réducteur, Protéine

[Biochimie] purification proteines

Voila j'ai une question qui m'est venue à l'esprit. pourquoi utilise t-on du beta-mercaptoethanol dans le tampon d'elution d'une proteine et dans le tampon de dialyse. Je pensais que le beta-mercaptoethanol etait une reducteur qui denaturait la proteine donc à la fin de la purif la proteine devrait donc être inactive.  [...]

[Biochimie] chaine polypeptidique

Dans une électrophorèse, c'est un peu compliqué, il faut être en condition dénaturante (avec du SDS par exemple) et utiliser du beta-mercaptoéthanol qui est un agent réducteur des ponts dissulfure. Cela va permettre de complètement dissocié la protéine. Cependant, selon ce que vous connaissez, il y a plusieurs démarches.  [...] La cristallographie reste le meilleur moyen de retrouver la structure fine de ta protéine mais la préparation d'échantillon est complexe et non garantie (extraction non dénaturante, cristallisation de la protéine, etc..).  [...]

[Biochimie] electrophorese

PS. quelques précisions pour interpréter un gel, chaque bande constitue une sous-unités protéique, bien sur, il faut voir si ta protéine a des ponts disulfure et que durant la manip, il y a eu utilisation d'un agent réducteur (le beta-mercaptoéthanol qui réduit les ponts disulfure).  [...] C'est pour ça que j'insiste sur le fait de savoir ou non si il y a un agent réducteur car les résultats peuvent être interpréter différament.-D.  [...]

Liaison entre acide aminé

Si le milieu est réducteur, cette réaction n'interviendra pas. Pour étudier et éviter l'agrégation de protéine riche en cystéines, on utilise donc des agent réducteur (TCEP ou DTT la plupart du temps).  [...] A noter que le nom de l'acide aminé change lors de cette réduction. deux cystéines liées sont en fait des cystines selon la nomenclature.  [...]

[Microbiologie] glucide, forme acyclique, cyclique et liaisons glycosidiques

on va prendre le glucose comme exemple, ce sera le plus simple. la forme non cyclique (linéaire), la forme cyclique pyrannique, et la forme furanique. Tous les oses libres ou en position terminale réductrice peuvent changer de conformation (cela se fait naturellement).  [...] ainsi il y a 1 forma linéaire, 2 formes furaniques (alpha et beta) 2 formes pyraniques (alpha et beta). la définition du alpha et beta est aléatoire je le répete et c'est le carbone 1 (réducteur) qui edéfini la liaison. après pour la liaison glycosidique, ca va dépendre de l'enzyme, qui peut etre ou pas spécifique de alpha ou beta, mais plus spécifique du lien par exemple 1-4 ou 1-3.  [...]

[Immunologie] Purification des IgY.

En effet on a effectué une purification d'IgY à partir d'oeufs de poules immunisées par du BSA, pour analyser nos résultats, on a effectué une SDS-PAGE, pour le protocole de la SDS-PAGE on a utilisé des IgY avec et sans bêta-mercaptoéthanol, ma question c'est quoi l'utilité de ces 2 préparations.  [...] selon moi, l'échantillon sans agent réducteur sert à évaluer approximativement la taille totale de la protéine soit l'Ac IgY. Alors que l'échantillon avec agent réducteur permet de savoir le nombre de sous-unités qui forment les IgY purifiés.  [...]

[Biologie Moléculaire] Tampon SDS-PAGE

le SDS dans un WB permet aux protéines d'avoir une charge proportionnelle a leur masse et donc de les faire migrer selon leur poids moléculaire indépendamment de leur structure. Le SDS a d'autres utilités, on le trouve dans certains tampons de lyse ou il a un role de détergent des membranes.  [...] Attention. Ce n'est pas le SDS qui coupe les ponts disulfures lorsqu'on fait un gel dénaturant, mais un réducteur comme le bêta-mercaptoéthanol.  [...]

[Biotechnologie] Sds-page

Je n'y comprend rien et c'est bien trop compliqué pour moi mais il est mis que le beta-mercaptoéthanol est un agent réducteur qui réduit les ponts disulfures.  [...] un détergent anionique fort. le sodium dodecyl sulfate (SDS) qui enveloppe les chaînes polypeptidiques des protéines de charges négatives. Ces charges se repoussent er déplient les chaînes polypeptidiques.  [...]

[Biochimie] Problème de migration de gel

Les pistes 1 à 3 sont des protéines de type salino solubles du blé sans réducteur ni alkylant, les pistes 4 à 6 sont les mêmes protéines réduites et alkkylées.  [...] Il aurait été intéressant de tester la réduction sans l'alkylation sur les protéines salino solubles, afin de savoir si la différence observée entre les pistes 1/3 et 4/6 est due à l'alkylation ou à la réduction. En me basant sur les gliadines de blé je dirai que c'est simplement la réduction.  [...]

[Divers] questions pour un mordu de bio

si tu penses à la digestion, enzymes pepsine, trypsine, chymotrypsine... mais on peut rendre une protéine non fonctionnelle par la dénaturation (chauffage, milieu réducteur il me semble, etc...).  [...] D'où le problème pour les organes glucodépendants pendant le jeûne prolongé. on est obligé soit de dégradé des protéines pour continuer la néoglucogénèse, soit de faire la cétogenèse.  [...]