• Forum - Bactéries, Plasmide, Résistance, Antibiotique

plasmide-clonage

Tous gène de résistance à un antibiotique (Ampiciline par exemple), te sert en fait a sélectionner tes bactéries ayant le plasmide.  [...] on met ensuite le plasmide dans des bactéries qui n'ont pas justement de géne re resistance a l'antibiotique, ce qui permet de localiser celle qui ont reçu le plasmide.  [...]

[Microbiologie] bacterie resistantes

je dois cultiver des bactéries possédant un plasmide de résistance à un antibiotique. Dans le bouillon, je dois mettre cet antibiotique. Je ne comprends pas pourquoi puisque les bactéries sont résistantes Pouvez m'éclairer.  [...] En faisant un milieu de culture normal, tu auras donc développement de colonies bactériennes résistantes à ton antibiotique, mais aussi de colonies non résistantes.  [...]

[Biochimie] Resistance à la zeocine pourquoi ?

j utilise la zeocin pour screener des bactéries transformées par un plasmide PICZ contenant le géne de resistance a cet antibiotique et donc pour controler le clonage.  [...] En procédant à l'extraction de l'ADN plasmidique pour controler la presence du plamside recombinant, je n'ai trouvé aucun plasmide et ça m'a intrigué comment est ce possible d'ou est ce qu'elles tiennent cette resistance ce sont pas des bactérie satellite a mon avis selon leur taille.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage avec plasmide

En générale YFG est couplé à un gène rapporteur (qui permet la sélection des plasmides qui intègrent effectivement YFG). C'est souvent un gène de résistance chez les bactéries. Ainsi lorsqu'on place les bactéries qui ont intégré le plasmide dans un milieu avec antibiotique, ce sont celles qui survivent qui on intégré YFG étant couplé audit gène de résistance à l'antibio.  [...] Pas nécessairement de l'ampicilline. Le choix du marqueur de sélection dépend du plasmide que vous utilisez. Le plus courant est que ce plasmide contient un gène de résistance à l'ampicilline. Quand vous transformez votre bactérie avec votre plasmide, ce dernier lui confère la résistance à l'ampicilline.  [...]

Plasmide et gène LacZ

Pour cela on utilise un gène de sélection. Le plasmide ci-dessus possède un gène Ampr, qui procure à la bactérie un caractère de résistance à un antibiotique. l'ampicilline. En milieu contenant de l'ampicilline, seules les bactéries ayant intégré le plasmide pourront survivre.  [...] Je pense qu'il y a une erreur parce que les bactéries non transformantes ont déjà été éliminées par l'action de l'antibiotique (Amp). Le système LacZ permet de différencier les bactéries (ou colonies) qui ont un plasmide avec l'insert (bactéries transformantes recombinantes) et celle qui ont le plasmide sans l'insert (bactéries transformantes non recombinantes) de part la couleur des colonies observées sur boîte de Pétri (si le milieu est préparé avec de l'IPTG et du XGal).  [...]

[Biologie Moléculaire] Plasmide génie génétique

Les gènes de résistance permettent de sélectionner les bactéries qui ont intégré le plasmide, sur milieu sélectif (c'est à dire milieu nutritif + antibiotique le plus souvent).  [...] Si on combine antibiotique et X-Gal dans le milieu nutritif, les bactéries qui auront poussé et qui seront blanches auront intégré un plasmide contenant un insert. Cela permet d'accélérer le criblage des bactéries qui nous intéressent.  [...]

[Biologie Moléculaire] Contamination transformation

Je ne récupère aucun ADN plasmidique...il n'y a pas forcément d'ADN plasmidique dans des bactéries... Ce qui veut dire que ma contamination provient d'une bactérie résistante à l'antibiotique mais qui n'a pas intégrer un plasmide parasite issu du labo porteur de la résistance Ampi.  [...] non pas du tout...je ne veux pas intégrer le gène de résistance. En fait j'ai des bactéries résistantes à l'ampi qui poussent sur mes boites ainsi qu'en culture liquide et qui n'ont rien à voir avec mes plasmides ou d'autres plasmides manipulés au labo.  [...]

[Biologie Moléculaire] Choisir le bon vecteur?

Pour ce qui est finalement du choix du vecteur, il te faut un vecteur contenant une origine de réplication procaryote, un gène de résistance à un antibiotique et pourquoi pas le gène beta-galactosidase à cheval du polylinker (cela permet de sélectionner les bactéries qui ont un plasmide ayant intégré un insert), et bien sûr le polylinker.  [...] J'ai moi aussi de la difficulté a trouver un vecteur approprié, Et Je ne comprend pas pourquoi le bon vecteur dans cet exemple serait PinPoint xa-1 Selon ce que j'ai vu il ne possede pas de sites de restriction communs avec la sequence d'ADNc dans sa region du gene de resistance Je ne comprend pas d'ailleurs pk le site de restriction doit se trouver dans la sequence de resistance a l'antibiotique et non ailleurs dans le plasmide.  [...]

[Génétique] Plasmide

L'exemple simple de l'avantage sélectif est l'antibiorésistance. Dans les labos nous utilisons les plasmides en les introduisant dans des bactéries pour qu'elles puissent produire certaines protéines ou même récupérer de grosses quantités d'ADN. Et pour sélectionner que les bactéries ayant intégrer ces plasmides, nous mettons aussi un gène de résistance à un antibiotique dans le plasmide.  [...] En faisant pousser sur un milieu avec l'antibiotique, celles sans plasmide meurent. Mais si vous oubliez de mettre l'antibiotique dans le milieu (ou que celui ci est périmé ) les plasmides vont rapidement disparaitre. La réplication du plasmide coute de l'énergie, hors la gestion de l'énergie est un point critique chez les bactéries.  [...]

[Génétique] Plasmide F et résistance aux antibiotiques

En effet ce plasmide est transmis par une bactérie F+ donneuse à une bactérie F- receveuse qui devient à son tour une bactérie F+ donneuse potentielle. Cependant aucun gène de résistance à un antibiotique n'est porté par le plasmide F.  [...] Les transferts horizontaux de gènes (HGT) sont considérés être dus à des transductions phagiques (très généralement). Le transfert de gène de résistance aux antibios portés par des plasmides est un HGT un peu particulier. en fait, les phages fonctionnent sur le mode headful package, càd qu'ils mangent de l'ADN génomique de la cellule hôte jusqu'à ce que leur capside soit remplie.  [...]