• Forum - Bactérie, Glycérol, Concentration

[Microbiologie] Congélation de souche

Si tu pouvais préciser au moins le genre ou l'espèces que tu souhaites congeler, il serait plus facile de répondre à ta question car cela dépend de l'organisme étudier. Personnellement pour la conservation de bactérie j'utilise du glycérol à 40% en concentration final, cela suffit amplement à la conserver.  [...] Cependant j'ai pu remarquer qu'une souche bactérienne congeler et conserver aux -80°C de cette manière depuis près de 15 ans avait plus de mal à se reveiller qu'une souche récement congeler.  [...]

[Biologie Cellulaire] transfection

Le Glycérol c'est pas le top pour les cellules en général. Quand je congèle mes bactéries après miniprep la concentration finale en Glycérol est de 10% et je n'ai jamais eu aucun problème pour les faire repartir même en grattant un peu pour une midiprep de 200ml.  [...] Nous utilisions du glycerol pure et stérile (99%), pour une concentration finale de 25% (jusqu'à 50% pour les bactéries fragile, c'est à dire avec un grand plasmide (entre 15 et 20kpb).  [...]

[Physiologie] phage lambda

si on introduit l opérateur droit du phage lambda dans une bactérie dont le milieu de culture contient du glycérol comme seule source de carbone,la protéine CI est elle synthétisée.  [...] le represseur CI ne pourra pas etre synthetisé car le milieu de culture ne contient pas de lactose,la bacterie ne pourra pas survivre ainsi que le phage,est ce ca.  [...]

Ladder 100 pb

Tout dépends de ton fournisseur. Généralement, en tappant dans google le nom du fournisseur et la ref du produit, tu dois tomber sur la fiche technique (et la méthode de préparation). c'est le moyen le plus sur. Tu peux aussi les appeler ou leur envoyer un mail, ils sont généralement au petit soin avec leur client (en tout cas pour beaucoup d'entre eux).   [...] Sinon, si tu n'as que les ADN, dans mon précédent laboratoire nous diluions au demi les ADN dans du glycérol (concentration final en glycérol entre 20 et 50%) puis nous rajoutions quelques microlitres de bleu de bromophénol, afin de pouvoir voir notre dépôt.  [...]

[Biologie Cellulaire] Aide pour l'interprétation d'observations microscopiques

Et avec la solution 1 (de glycérol), il a été difficile de voir les lignes des lames de Malasseze (dsl pour l'ortho) tellement la concentration en cellule était élevée.  [...] La concentration cellulaire de départ = le nombre de cellules par unité de volume au début de l'expérience (avant congélation donc).  [...]

[Biochimie] migration sds page

Merci en tout cas pour vos réponse je n'ai pas d'échantillons pour re-tester cette semaine mais c'est prévu pour le début de semaine prochaine, donc je verrais pour l'influence de la concentration en glycérol.  [...] je viens de recommencer un gel en diminuant la concentration en glycérol, en prenant de nouveaux produits (acrylamide, tampons avec le bon pH, b-mercaptoéthanol...). La migration est un peu meilleur mais mes protéines ne dépassent toujours pas la moitié de mon gel de séparation alors que mes marqueurs et mon front de migration sont OK.  [...]

Plaques ELISA maxisorp, Covalink, Amino ?

en fait j'ai l'impression que quasiment rien ne s'adsorbe au fond de mes puits quand c'est mon anticorps qui est coaté par contre si je coate l'antigène pour le titre de l'anticorps (soit l'anticorps de capture soit le révélation) la ça marche super bien et j'ai meme des faibles concentrations d'antigènes par puits qui sont reconnues (2ng/mL 100µL/puits.  [...] D-Glycérol pour la conservation de tes Ac puis dans un tampon bicarbinate pour ton coating. Avec ceci essaie d revoir de temps à autre la concentration de tes réactifs en fonction des résultats obtenus. Attention la nature de tes Ac n'est pas connue.  [...]

[Microbiologie] Congélation de cellules de levures

J'utilise depuis peu des cellules de levures de type Saccharomyces cerevisiae (AH109), et pour les congelés j'utilise 12% de DMSO (comme je le fait pour mes bactéries. E. coli et Caulobacter crescentus ), mais voila, il y a quelque temps des personnes m'ont dit que pour congéler des cellules de levures, il fallait mieux utiliser du glycérol, est-ce vrai Si oui, à quelle concentration.  [...] Je ne suis pas un expert en levures, mais je trouve que 12% de DMSO ça fait beaucoup. Je sais que dans mes cellules de mammifères, je met pas plus de 5%. J'utilise 20% de glycerol pour mes E. coli, ça fonctionne très bien.  [...]

[Biochimie] L'agitation thermique au coeur de la cellule

je pense que vu la densité monstrueuse qui rêgne au sein de la cellule (le cytoplasme bactérien possède une concentration en protéine de l'ordre de 200-300 mg/ml...), la part de l'agitation thermique dans les mécanismes réactionnel entre molécules doit s'en retrouver bien limité.  [...] La viscosité, que celle ci soit du à la concentration en protéine ou à l'ajout de glycérol est clairement un frein à la biochimie interne. C'est bien pour ca que je me demande parfois quel intêret il y a t il a caractériser des Km, Kcat, etc... en solution, sans tenir compte de ce molecular crowding.  [...]

[Biologie végétale] Glycophyte et halophyte

Tandis que les halophytes exigent ou tolèrent la salinité qui est du même ordre que celle de l'eau de mer, et ceci parce qu'ils présentent des adaptations variées au milieu salin. exclusion du sel par transport actif au niveau des racines. sécrétion de sel par des glandes des feuilles.   [...] La concentration du sel est parfois assez élevée dans la sève et les vacuoles, mais le cytoplasme en contient peu. il est cependant isotonique aux vacuoles à cause de l'abondance de solutés organiques. principalement des polyols (glycérol, sorbitol, mannitol) ou des acides aminés (glycine, proline, alanine) dont la fonction amine est méthylée.  [...]