• Forum - Avantage, Expérience, Cellules

[Biochimie] Experience in vivo

j'aimerai savoir quel est l'avantage d'une experience pulse chase effectuée in vivo sur des cellules infectées ( du VSV).  [...]

[Biochimie] purification ADN thymus de veau

1. Je voudrais savoir quels sont les avantages d'utiliser le thymus de veau comme source d'ADN Pourquoi ne pas utiliser utiliser une autre espèce animale J'ai cherché et j'ai réussis à trouver que ces cellules ont un rapport nucléo cytoplasmique très élevé, mais je ne suis pas certaine de comprendre ce que cela veut dire et quel avantage cela a dans cette expérience.  [...] Le thymus de veau est un abat - une pièce de boucherie courante. S'agissant en plus d'un organe lymphoïde, il est riche en lymphocytes - des cellules ayant le rapport volume du noyau (ADN) sur volume total des plus élevés. Ce qui permet de se fournir à moindre frais (+ dans un supermarché) du matériel biologique (riche en ADN) pour une première expérience d'extraction d'ADN à partir de tissu animal.  [...]

[Physiologie] Propriétés électriques des membranes

Lorsqu'on place une électrode à l'intérieur de la cellule, et qu'on utilise la méthode Voltage Clamp. On impose le potentiel membranaire. Par exemple, on va dire le potentiel de repos d'une cellule quelconque. -60mV.  [...] La technique de mesure de l'exocytose par suivi de la capacité membranaire (Cm) a notamment été menée intensivement dans des cellules neuroendocrines (cellules béta du pancréas ou cellules chromaffines de la médullosurrénale) ou du système immunitaire (mastocyte) qui présentent par rapport aux neurones l'avantage de présenter des géométries simples (sensiblement sphériques et de taille réduite), qui favorisent une fixation spatialement homogène de la tension expérimentalement appliquée ( space-clamp ).  [...]

Virus = vivant ???

On sait que la résistance aux antibiotiques, aux métaux lourds, la capacité à produire des toxines ou à acquérir les déterminant de la pathogénicité sont portés par des génomes viraux ou de plasmides. En donnant un avantage sélectif aux cellules qu'ils infectent, le virus est positivivement sélectionné lui même, l'evolution ne manque pas d'astuce.  [...] 2-Quand tu dis, le virus est sélectionné lui-même, cela signifie, qu'il ne tue pas les cellules dans lesquelles il est et qu'il leur donne en plus un avantage, qui, grâce à la sélection naturelle va leur permettre de proliférer... et le virus alors.  [...]

Question sur le cancer - mutations

Une cellule devient potentiellement cancéreuse lorsqu'elle acquiert par mutation un premier avantage sélectif. Elle donne alors naissance à des cellules avec ce même avantage sélectif. Pour ces dernières cellules la probabilité qu'une seconde mutation apparaisse et soit sélectionnée est plus importante que pour la cellule initiale.  [...] Il y a plus grave que les mutations ponctuelles, il y a aussi les anomalies chromosomiques, qui sont pour certaines provoquées par une déficience des systèmes de contrôle de la division cellulaire, ce qui entraine une mauvaise répartition des chromosomes entre les cellules filles.  [...]

[Génétique] Lignée cellulaire Humaine

Je suis a la recherche d'une lignée cellulaire humaine immortalisée, qui présenterai le moins de réarrangements chromosomiques possibles.  [...] NB/ pour la petite histoire, le labo en question a finalement achete des cellules primaires chez atcc ou lonza. Il est possible d'y réserver un lot de cellules, ce qui permet de travailler pendant qques mois/annees avec des cellules issues d'un meme prelevement.  [...]

marqueurs de sélection

Aucune méthode de transformation n'est efficace à 100%. La proportion de cellules transformées dépasse en effet rarement 1‰. Pour sélectionner les cellules transformées, le fragment d'ADN utilisé doit contenir un gène conférant à ces cellules un avantage sélectif dans certaines conditions de culture.  [...] Si par exemple le marqueur était la production d'un pigment, il n'est même pas certains d'avoir assez de bactérie pour obtenir des colonies de la couleur adéquates si les 1% transformées de l'inoculat sont inhibées par chimiotactisme - auquel cas après croissance on peut très bien tomber à 0,1% ou même 0,001% de cellules transformées au sein de notre culture résultante.  [...]

Techniques utilisées en lab de biomol

Les techniques et manipulations que je devrais utiliser cet été, sont précisément la PCR, la préparation de vecteurs plasmidiques, la préparation de culture de cellules animales et la transfection.  [...] La culture cellulaire demande aussi de la concentration, car toutes les précautions pour éviter les contaminations ne deviennent pas tout de suite des automatismes.  [...]

[Biologie Cellulaire] Modèles d'étude

Je voulais savoir quel est l'interet d'utiliser des modèles animaux, KO...etc, par rapport à d'autres modèles in vivo tels que des lignées cellulaires primaires humaines ou murines.  [...] Une lignée cellulaire ne reconstitue pas la physiologie d'un organe et encore moins celle d'un individu entier. Si vous avez une lignée de cellule de Sertoli vous n'avez pas une étude du testicule pour autant. De plus les lignées stables ont souvent étés repiquées tellement souvent qu'elles ne sont plus nécessairement prafaitement représentative du type cellulaire dont elles sont dérivées.  [...]

[Biochimie] différence cellules primaires - lignées cellulaires ?

Le gros avantage de ces cellules, c'est qu'elles ont (théoriquement) une morphologie, un comportement et une activité très proches de ce qui se passe in vivo. Cependant, ces cellules sont moins accessibles (accès aux prélèvements, prix chez un fournisseur), plus fragiles, exigeantes et se cultivent beaucoup moins longtemps que les lignées.  [...] Exemple parmi beaucoup d'autres. mes cultures primaires d'hépatocytes issues de souris a jeun cessent rapidement d'exprimer des marqueurs du métabolisme comme l'enzyme de la néoglucogénese, la PEPCK. La dédifférenciation causée par la mise en culture peut transformer une culture primaire en une culture de cellule quasiment dédifférenciées, il faudra donc bien connaitre ces cellules et l'évolution de leur comportement avant toute expérimentation.  [...]