• Forum - Articles, Procédé, Clonage, étape, Transformation, Bactéries

[Microbiologie] mutagenèse dirigée par pcr

Pouvez vous s'il vous plaît m'aider je suis bloquée à cette étape si vous avez des articles ou bien des kits j'ai besoin de plus d'éclaircissement.  [...] mon encadreur m'a demandé de ne pas passer par l'étape de clonage préalable, de muter le gène en question par la méthode des 4 oligos et de passer directement à l'étape suivante qui clonage transformation des bactéries compétentes pour exprimer le gène muté, moi aussi je me pose des questions parce que dans tous les articles que j'ai lu j'ai trouvé que les chercheurs ont procédé d'abord à un clonage après ils ont effectué trois pcr successives après ils ont passé à l'étape de transformation des bactéries moi je dois zapper la première étape je n'ai pas osé lui poser la question pour qu'elle raison à votre avis.  [...]

Hybridations plasmides et sondes

Okay...mais alors quel est l'intérêt d'être passé par des plasmides si on ne les intègre pas à des bactéries pour les cloner (transformation).  [...] Le reel clonage se situe en amont de la premiere manip. Il correspond en fait a une manipulation de l'ADN (en vue de l'insertion dans un plasmide par exemple). Evidemment, suite a ton clonage tu auras besoin de transformer des bacteries puis de verifier ton clonage (manip 1, 2 et 3).  [...]

[Biologie Moléculaire] clonage moléculaire

bonjour à tous, lors d'un clonage moléculaire, avec pour cellule hôte, une levure (c.eucaryote), comment on procéde pour intégrer notre ADN insert dans cette levure...autrement reformulé. comment procéder pour transformer notre insert dans la levure.  [...] Tu ne mets pas comme ça ton insert ds la levure. Il faut passer par l'internmédiaire d'un vecteur par exemple un plasmide mais la nature du vecteur peut changer selon la taille de l'insert ou la nature de l'hôte récepteur.   [...]

enzymologie

en fait, j'ai trouver uniquement les informations suivantes concernant les applications d'enzymes dans le domaine agroalimentaire.   [...] - utilisation des enzymes dans le procédé de transformation des matières naturelles alimentaires (faciliter le procédé, améliorer les caractéristiques organoleptiques et nutritionnelles, corriger les déficiences naturelles ou permettre la valorisation de certains sous produits.  [...]

[Biochimie] Mecanisme de ligation SOS clonage

j 'ai procédé à la ligation ds les proportions 1/1, 1/3, et1/5 mais aprés transformations ds ECOLI (top 10), extraction plasmidique par lyse alcaline et screening par pcr...Pas de clonage. j'ai fais 3 tentative jusque la.  [...] Mon clonage a encore echoué j'ai refais la ligation la denriére fois en diluant le milieu reactionnel et en augmentant la quantité de ligase, j'ai aussi opté pour l'incubation en bain marie. En plus, j'ai transformé deux bactérie pour verifier la compétence (top 10 et JM109) avec ça j'ai effectué la ligation avec plusieurs rapport insert / vecteur,j'ai vraiement tt essayé mais rien.  [...]

Implantation de fibroblaste

Je voudrais savoir si techniquement l'implantation de fibroblaste au niveau du derme est possible.   [...] Comment realiser ce procédé Existe t il des articles à ce sujet.  [...]

[Biochimie] Dosage de proline

comment procède t'on pour doser l'aa proline chez les bactéries.  [...]

les bacteries qui peuvent contaminés nos aliments

Ca dépend surtout du type d'aliment et du type de procédé de transformation qu'il subit.  [...] Quelques informations complémentaires (type de matière première employée, type de produit fini, process entre les deux) seront les bienvenues pour répondre à ta question.  [...]

[Biologie Moléculaire] Décision de replication de l'ADN

Il existe une séquence origine de réplication assez conservée chez les Procaryotes, on sait assez bien la reconnaître et donc on peut savoir que la réplication bactérienne débutera à cet endroit et pas ailleurs. Les études concernant la réplication chez les Eucaryotes ont été pas mal menées chez S. cerevisiae.  [...] On a construit le plasmide suivant. ORIcolE1, gène conférant résistance à l'Amp, gène de sélection chez les Levures ( ura3 + ), en insert = fragment d'ADN génomique de S. cerevisiae. On a procédé à une transformation des cellules de S. cerevisiae [ura - ] par cette construction.  [...]

quel grossissement de microscope

Nous aimerions acheter un microscope pour notre école afin d'observer des bactéries et du mycelium.  [...] Quel grossissement suffit Que verra-t-on vraiment et faut-il colorer ces bactéries Comment procède-t-on avec des moyens artisanaux.  [...]