• Forum - ARN, Résultats, Dosage, Concentration

[Biochimie] Dosages et composition cellulaire

Tout d'abord, j'ai donc effectué un dosage d'ARN dans 15 tubes différents (les 7 premiers contenants une concentration connue et les7 autres contenant de l'arn que j'ai récupéré sur mes foies et reins) et j'ai tracé la courbe Absorbance =f([Concentration]).  [...] Enfin, autre petite chose. j'ai le résultat de mes concentrations en mg/ml, comment faire pour les convertir en microg/mg de protéines ou en mg/g de protéine.  [...]

[Biologie Moléculaire] Dosage des ARN à l'orcinol

Je ne connaissais pas le dosage à l'orcinol. En multipliant par 2, obtient-tu une concentration plus proche de ton dosage spectro.  [...] Donc, si tu a une différence concentration avec tes 2 dosages (spectro et colorimétrique), c'est surement du au fait que le dosage spectophotométrique (a 260nm) est moins précis a mon avis.  [...]

[Microbiologie] courbe etalon

C'est un peu vague comme question. Veux-tu déterminer la concentration de E.Coli avec une méthode de dosage Puis déterminer la concentration de E.Coli en fonction des mesures obtenues avec ta méthode de dosage.  [...] Si c'est le cas, tu peux faire une dilution sérielle de E.Coli (avec à la base une concentration que tu peux mesurer facilement) et mesurer les valeurs de ta technique de dosage pour chaque concentration.  [...]

[Biochimie] Dosage spectrophotométrique des protéines

LXR, je ne sais pas si le Nanodrop est adapté au dosage d'un extrait protéique. Pour une protéine oui, quand on connait son epsilonn. En tout cas pour avoir essayé le dosage de bradford au nanodrop dans tous les sens. oubliez.  [...] Ton nanodrop a-t-il une longueur d'onde réglable Car dosant les protéines recombinantes, ARN et ADN, je pensais que cet appareil ne fonctionnait qu'à 260 et 280 nm. Le dosage de Bradford se faisant plutôt à 600 nm, si ton nanodrop ne peux pas se régler à cette longueur d'onde, ces résultats ne m'étonnent pas.  [...]

[Biologie Moléculaire] j'ai besoin d'aide concernant mes echantillons d'ARN

j'ai eu des echantillons d'ARN tres concentrés apres dosage par spectro,quand j'ai fait le calcule pour faire la reverse transcription,le volume que je dois prelever est tro petit à prelever(=de 0.44µl)alors que ma pipette mesure à partir de 0.5µl,je ne sais pas quoi faire.  [...] tu dilues 2x ton échantillon, et tu prélèves 0.88ul de cette dilution au lieu de 0.44ul de la solution concentrée. Sinon c'est encore plus simple de diluer 10X et de prélever 4.4ul (plus les volumes sont importants, plus les erreurs sont proportionnellement faibles).  [...]

Extraction ARN totaux

Pour extraire les ARN totaux d'une culture cellulaire ou bien de tissu j'utilise la méthode classique phénol-guanidine isothiocyanate-chloroforme. J'obtiens des ARN de bonne qualité or lors du dosage spectrophotométrique j'ai une absorption assez importante à 230nm qui est légèrement inférieur voire identique à l'absorbance à 260nm.  [...] Personellement, j'utilise les kit QIAGEN pour effectuer mes extractions. Cette méthode consiste à capturer les ARN totaux sur une colonne et de la nettoyer par la suite. La dernière étape consiste à récupérer les ARN dans de l'eau RNase free. Tu peux effectuer ton dosage par la suite sans soucis.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ARN

j'ai fait une extraction d'ARN au trizol qui a plutôt bien fonctionnée. J'ai fait un dosage afin de vérifier les concentrations et un gel afin de vérifier les contaminations. Tout était nikel. J'ai ensuite fait un traitement DNAse avec un kit turbo DNAse, fait mes dosages et de nouveau un gel qui paraissaient bons.  [...] Afin de vérifier la présence d'ADN, j'ai fait une PCR avec des primers beta-tubuline. Et là, j'ai eu d'une part des fragments de beta tubuline amplifié dans tous mes échantillons mais d'autre par des fragments bizarres un peu partout sauf dans mon témoin positif.   [...]

Intransmissibilité du VIH sous traitement ?

Si cette étude confirme ses résultats et seulement si, on pourra étendre son résultat aux populations concernées, à savoir au couples qui se font confiance et qui savent et déclarent à leur partenaire quand ils ne prennent pas leur traitement correctement, qui ne cachent pas quand la charge virale remonte et qu'il faut s'abstenir mais pas à ceux dont le seul motif est de cacher la vérité aux autres et de profiter d'eux.  [...] - Il ne faut pas oublier non plus que le dosage de l'ARN viral peut être (rarement) faux (sans rapport avec ce qu'il est vraiment), c'est ce qu'on appelle en statistique un écart à la moyenne. C'est très rare mais quand on suspend une vie à un résultat (en l'occurrence pas la sienne mais celle d'un partenaire de hasard ou régulier), celui-ci demande à être confirmé.  [...]

[Divers] Problème de comparaison de résultats dosage protéique

Lors du dosage BCA (dosage colorimétrique avec une gamme étalon) j'ai des mg/mL de solution ressolubilisé tandis que pour le Kjeldahl, j'ai des % de protéine du produit fini.  [...] J'aimerais savoir comment je pourrais transformer ce pourcentage en concentration ou l'inverse afin de pouvoir comparer.  [...]

Ramener concentration d'un dosage cytokine à la quantité réel de cellules.

Ramener concentration d'un dosage cytokine à la quantité réel de cellules.  [...] Je voulais donc savoir comment ramener la concentration en cytokine dosé au nombre de cellules.  [...]