• Forum - ARN, ADN, But

[Génétique] Hybridation ADN-ARN !

C'est quoi une hybridation ADN-ARNje sais ce que c'est qu'une hybridation mais comment peut-elle se faire entre l'ADN et l'ARN Serait ce par des simple liaisons hudrogéne ou autre Et c'est quoi le but de tout ça...Merci.  [...] le but dans une hybridation in situ c'est de voir si l'arn est present. on met l'adn avec une sequence qui est complémentaire à l'arn qu'on veut suivre. cet adn qu'on a marqué soit par un phosphate radioactif soir par un un groupement qui est reconnu par un anticorps couplé à un fluorochrome.  [...]

[Biochimie] Nucléase S1

il est question en effet de nucléase S1, je me suis renseigné il est dit que cette enzyme dégrade les acides nucléiques simples brin, mais qu'elle ne peut pas détruire les hybrides ADN-ARN.  [...] Selon moi, le S1 mapping commencerait par le marquage d'une sonde d'ADN, puis on dénature pour n'avoir qu'un seul brin d'ADN, et ensuite on va l'hybrider avec une séquence d'ARNm en 5' de celle-ci, puis on utilise la nucléase S1, afin de couper les parties qui ne se sont pas hybridées.  [...]

[Biologie Moléculaire] pb dosage ARNtotal spectro

J'ai fait ensuite un gel pour vérifier l'absence d'ARN suggérée par les dosages au spectro. Et pourtant, j'ai bien de l'ARN dans mes échantillons...Il faut cependant que je puisse doser mes ARN car après je fais un traitement DNase (but = qPCR, et mes amorces se fixent aussi bien sur l'ADN que sur l'ARN.  [...] Oui je retrouve de l'ARN...mais je vois peu la bande qui correspond à l'ARN 28S. Je vois bien la bande qui correspond au 18S + smear = ARNm. (il faut dire aussi que je n'ai pas de marqueur de migration d'ARN, du coup je mets comme marqueur du marqueur 1kb ADN double brin alors les tailles les distances de migration de correspondent pas entre mes ARN et le marqueur).  [...]

[Biochimie] PCR le but?

Etudier ses variations = tu peux ainsi, par exemple, regarder, précisément le mécanisme de régulation d'un pigment de couleur (du moins de son ARN, il y a après d'autres facteurs) ou je sais pas quelle molécule produite (molécule de résistance, qui ne doit normalement pas être produite dans les parties comestibles).  [...] Sinon rem81, un exemple d'utilisation d'une PCR. Déterminer l'abondance de transcrits (ARN), en présence ou absence d'un composé, afin de pouvoir quantifier l'expression de ce gene, et de déterminer ses modalités.  [...]

[Biologie Moléculaire] Taille des exons, des introns et des régions UTR

J'ai actuellement un souci pour déterminer la taille précise des introns et des exons dans une séquence d'ADNc donnée. Il me semble qu'un intron débute par un site donneur GT en 5', qu'il contient un site de branchement contenant une Adénine et qu'il se termine par un site accepteur AG en 3'.   [...] Le but est donc de rechercher toutes les régions entre un GT et un AG qui contiennent un A puis compter le nombre de nucléotides Cela me semble long et bizarre étant donnée la taille de la séquence d'ADN (ADN complémentaire et non ARN).  [...]

Détection bactériennes

Peut importe l'enzyme qui va couper l'ADN ou l'ARN, le but étant de détecter un ADN ou ARN coupé qui trahirait la présence de bactérie.  [...] une bactérie par millilitre c'est très peu. Avec toutes les méthodes connues tu vas être dans le bruit de fond. La PCR par exemple amplifie toujours quelque-chose dans les témoins négatifs. Il y a de l'ADN bactérien dans la taq, c'est connu et publié. Il te faudrait concentrer tes échantillons.  [...]

[Microbiologie] bactériophages ARN F spécifique

Lors de mes titrages, je prépare un milieu sans Rnase, et un avec Rnase. Sachant que le but est de comparer à la fin, combien j'ai des bactériophages à ARN dans mon échantillon. (et non à ADN).  [...] Par conséquent je fais la différence entre les bactériophages totaux, et les bactériophages à ADN ( vu que j'utilise la Rnase qui va inactiver tous les phages à ARN).  [...]

[Biologie Moléculaire] solubilité ADN, ARN dans le phénol

En fait, il faut savoir que les ARN sont sensibles au pH alcalin et en général, l'extraction ADN se fait en phenol/Chloroforme/IAA à pH 8 et nous aurons l'ADN en phase aqueuse avec les ARN endommagés, ce qui ne gêne pas pour certaines analyses mais pas pour d'autres d'où l'action de RNase dans certains cas.  [...] Et bien en fait cela dépend également du but de ta manipulation. Si tu fait une extraction d'ADN pour faire une PCR conventionnelle derrière, le fait qu'il y ait un peu d'ARN n'est pas vraiment grave. Puisque seul les ADN seront amplifié (je grossis la chose).  [...]

Expression de gène

On sait que les ARN totaux d'une cellule correspondent à l'expression génétique puisqu'ils sont issus des gènes ADN (en fait on sélectionne les gènes par le produit de ceux-ci qui est l'ARNm). Le but est de transformer ces ARNm en ADN complémentaire (ADNc) par rétrotranscription et de les amplifier par PCR (chacun des ARNm est amplifié proportionnellement à sa quantité de départ dans la cellule).  [...] Ils pourront par complémentarité des bases azotées, se lier à l'ADN qu'on a fixé au début, mais seulement si les gènes sont présents. Pour détecter ces hybridations il faudra au préalable marquer par un colorant les ADNc. On pourra donc savoir si la cellule dont on a prélevé les ARN totaux expriment ou pas les gènes qu'on a fixé et amplifié au début.  [...]

Passage d'une protéine à ADN??

Bon... ADN en ARN ca existe, ARN en ADN ca existe aussi, ARN en protéine également mais protéine en ADN non. J'en avais discutté avec Yoyo il y a un petit moment et tout ce qu'on peut dire c'est que le jour où ça sortira, le type aura le Nobel.  [...] en revanche aucun moyen n'a encore été decouvert pour passer d'une protéine a un ARN/ADN...il semble quand meme surprenant que ca soit la seule etape de l'expression génique qui ne soit pas réversible.  [...]