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[Biochimie] Western Blot

Par ailleurs, mes anticorps secondaires sont un peu vieillos mais néammoins congelés avec du glycérol. Mon signal final sur le film est faiblard. j'ai vérifié mon kit ECL et même employé celui d'un collègue. Mon anticorps secondaire peut-il être périmé à ce point en 2 ans Faut-il l'utiliser à l'obscurité comme ceratin le préconise bien que d'ordinaire il marchait même à la lumière.  [...] Par ailleurs, mes anticorps secondaires sont un peu vieillos mais néammoins congelés avec du glycérol. Mon signal final sur le film est faiblard. j'ai vérifié mon kit ECL et même employé celui d'un collègue. Mon anticorps secondaire peut-il être périmé à ce point en 2 ans.  [...]

[Biochimie] Anticorps anti-LC3 de chez Abgent pour WB

Un de mes collègue utilise un anticorps anti-LC3 depuis pas mal de temps, je lui demanderais demain lequel il utilise et s'il marche bien. Dans ce cas, je te file le nom du fournisseur par MP pour éviter de faire de la pub.  [...] Je rencontre des problèmes similaires à ton premier intelocuteur avec un anticorps abgent anti-LC3 en Western. Pourrais-tu me communiquer également la boîte fabriquant l'anticorps dont ton collègue est satisfait.  [...]

[Biologie Moléculaire] Mutagénèse dirigée qui ne fonctionne pas

Je me suis lancée dans une mutagénèse avec le kit LIGHTNING de Stratagène, designé des primers complémentaires (33pb)sur leur site selon leurs caractéristiques comportant mes 3 nucléotides, varié les concentrations en DNA lors de la PCR, la température d'annealing, les temps d'annealing et d'élongation, le nombre de cycles.  [...] L'idée maintenant c'est d'amplifier un fragment plus court (environ 3Kb) compris entre deux sites de restriction uniques (mais toujours autour de la zone qui m'intéresse bien entendue). Donc pour cela je design 2 paires d'oligos et réalise 3 PCR successives.  [...]

[Biologie Moléculaire] Programme de clonage

Dans cette fenêtre de construction, il faut ouvrir la séquence du vecteur, choisir les sites de début (simple clic) et de fin (double clic). Faire de même avec l'insert. Blunter si nécessaire et cliquer sur Ligate. Notez que si l'insert est, par exemple, EcoRI (début)/BamHI (fin) alors le vecteur doit être ouvert par BamHI (début) / EcoRI (fin).   [...] Oui, Serial Cloner a été développé pour ça. Pour reproduire in silico ce que nous faisons à la paillasse. J'ai attaché un petit film (que j'avais fait pour un collègue) qui montre comment sous-cloner avec Serial Cloner. J'espère que ça répondra à vos questions.  [...]

[Evolution] Homosexualité contre-nature? - Page 3

Arrivant sur cette discussion à la suite d'un signalement je voudrais faire deux rectifications. La première pour contredire mon estimé collègue.  [...] Je n'arrive jamais à comprendre ce que signifie être hétéro ou être homo. Si ça fait référence à l'attirance sexuelle envers un sexe ou l'autre, alors ces deux catégories ne sont que deux extrêmes d'une réalité bien plus souple.  [...]

Orques et requins. - Page 2

Mais quand on sait que l'évolution amène parfois à d'énormes simplifications (certains vers parasites ont par exemple perdu une grande partie des organes de leurs ancêtres) on réalise qu'il ne faut pas concevoir l'évolution de cette façon.   [...] Pour en revenir à l'orque. j'ai une collègue qui a bossé dans un delphinarium et qui m'expliquait qu'il fallait quand même faire très attention avec les orques... ça signifie que même apprivoisée, en captivité, ça reste des animaux dangereux (pouvant potentiellement blesser l'homme).  [...]

Incompréhension lecture ordonnance ophtalmologique

L'astigmatisme et son évolution semble dans une fourchette commune (ce qui est entre parenthèses). c'est l'évolution de la correction de l'Sil droit qui étonne mon Sil de néophyte mais c'est théoriquement possible (l'ophtalmo vous aurait signalé si c'était inquiétant).  [...] J'ai même redemandé à une autre opticienne de cette enseigne hier la signification de mes 3 ordonnances (alors que son collègue qui m'avait conseillé mardi n'était plus là ).Pour l'avant dernière ordonnance utilisée que j'avais citée ci dessus, elle m'a annoncé que j'avais une légère myopie et un astigmatisme.  [...]

[Biologie Cellulaire] cellules qui n'adhèrent pas...

Je n'ai pourtant pas trouvé à première vue de signe de contamination (la collègue à qui j'ai les ai montré non plus). Le milieu n'était pas trouble et n'avait pas changé de couleur. Je n'ai pas testé les mycoplasmes (nous faisons peu de culture cellulaire et ne sommes pas équipés pour tester régulièrement).  [...] Je me suis rendu compte après avoir décongelé que le pyruvate de sodium que j'avais utilisé était périmé depuis septembre 2013 (et ouvert depuis un bout de temps). Je me suis dit que dans la mesure où je filtre (sur filtre de 0,22µm) tout ce que j'ajoute au milieu de culture (sauf le SVF) ce n'était pas très important.   [...]

[Biologie Cellulaire] Problème de pousse HEK 293 après transfection

Merci pour vos réponses. Non je ne pense à une contamination mycoplasmique. aucun signe probant et les cellules non transfectées cad les boites de gardes ne présentent aucun problème. je côte les boites avec de la polylysine. j'ai d'abord cru à un problème de concentration de celle ci j'ai donc changé le coting. pas de changement.  [...] De plus pour les mycoplasmes nous avons changé de cellules et redécongelées. pas de changement.. incompréhenssible sauf ( il faut que je vérifie auprèsde ma collègue) si il s'agit du même pool cellulaire. sauf que les mycoplasmes d'après ce que je sais n'empeche pas les transfections en tout cas pas en tuant les cellules sauf si c'est un envahissement et alors il existent des signes.  [...]

Homéopathie uniciste - Page 7

Quand le premier, porté aux nues, déclare qu'un vaccin thérapeutique du sida pourrait voir le jour dans quatre ou cinq ans, la presse ne se prive pas de saturer les ondes pour diffuser la bonne parole, tant il est vrai qu'il s'agit d'une annonce majeure. Mais pour faire bonne mesure, il faudrait aussi signaler une conférence au cours de laquelle ce même génie de la science avait rendu un hommage posthume très appuyé à son collègue pourtant banni et discrédité, en octobre 2007.  [...] Cette conférence se tenait à Lugano (Suisse), le 27 octobre 2007. Et la première phrase de l'élocution de Montagnier est sans ambiguïté. Cette conférence est un hommage à Jacques Benveniste, qui était un de mes collègues. Au début, je ne l'ai pas suivi dans ses percées tout à fait nouvelles mais il se trouve que mes travaux sur le virus du SIDA ont conduit à me rapprocher de ses idées.  [...]