• Forum - Anticorps, Protéine, Cible

dosage immunologique

Dans un deuxième cas, tu peux aussi détecter des anticorps. Dans ce cas, tu coates ta plaque avec la cible de ces anticorps, par ex une protéine virale.  [...] Je permets donc juste une dernière question, plus pratique. Il y a donc au moins deux étapes avant la révelation (1/ incubation de l'échantillon biologique à tester et 2/ dépôt du 2ème anticorps couplé à l'enzyme). mais en pratique lorsqu'une femme fait un test de grossesse par exemple, elle ne dépose que de l'urine sur le test et pas d'anticorps secondaire couplés avec une enzyme, donc comment se fait la détection pour ce genre de test fait à la maison.  [...]

[Biologie Cellulaire] Marquage par Ac-FITC : du solide ?

Après la période d'incubation, j'aurais ajouté un anticorps anti-[protéine récherchée]. puis un second anticorps marqué au FITC et dirigé contre l'anticorps du complexe précédent.  [...] Lors d'une assistance à une thèse sur le biofilm marqué au FITC, on ne faisait que 3 lavages consécutives après 2h d'incubation et 22h d'incubation, lavage au PBS, donc je ne vois pas le problème si tu souhaite éliminer l'excès d'anticorps par ce moyen (enfin on utilisais des lectines nous, pas des anticorps ^^).  [...]

[Biologie Cellulaire] Traduction d'une protéine avec codon stop prématuré

J'aimerai regarder par immuno l'extinction de cette protéine. Mon anticorps qui détecte l'enzyme non muté cible la zone Nterminale.  [...] Or si je fais une immuno avec cet anticorps n'y a t il pas une risque que je détecte le fragment tronqué de ma protéine muté Sachant que le codon stop prématuré se situe au milieu du gène d'intérêt.  [...]

AIDE :sos: : les techniques d'étude en biologie

l'histologie est une étude morphologique d'un tissu (formes cellulaires, densité, etc...) puis tu descends dans les échelles avec la cytologie (étude des cellules, formes). enfin, l'autoradiographie te permet de visualiser la présence et la localisation d'une molécule en particulier, que tu auras préalablement marquée par un anticorps ou un élément radioactif.  [...] pour l'autoradiographie, une molécule radiactive (anticorps radiomarqué fixé à la protéine cible, atome radioactif incorporé dans ta molécule cible) emet un rayonnement qui noircit la pellicule photo. Développé dans le noir, seul la présence des éléments radiactifs sera visible sur la photo.  [...]

[Biologie Moléculaire] Phosphorylation sur tyrosine => dégradation par protéasome???

voila je voulais si la phosphorylation sur un résidu tyrosine pouvait cibler cette protéine vers une dégradation via le protéasome. Je n'ai trouvé que des complexes ubiquitine ligase qui se fixe à des sérines/thréonines phosphorylés mais jamais de tyrosines.  [...] Désolé de continuer sur le hors-sujet mais qu'appelez-vous phosphorylation in vivo Quelles méthodes pour l'évaluer Western sur la protéine cible avec un anticorps dirigé contre un phosphoépitope généré par la kinase Surexpression de la kinase, incubation brève avec P32, immunoprécipitation de la cible, gel SDS-PAGE puis autoradiographie Inversement avec surexpression de la cible,  [...]

[Biologie Cellulaire] Besoin d'aide dans l'identification d'une molécule !

Ca marche plutot bien pour les protéines qui interessent beaucoup de personnes dans le monde. Mais, des lors que tu t'interesses a une protéine un peu originale, pour laquelle peu d'anticorps ont ete produits, il n'est pas rare de trouver des anticorps peu specifiques, qui vont pouvoir se lier egalement a des proteines autres que celle qui nous interesse.  [...] Cela pourrait aussi être un produit de dégradation de ta protéine d'intérêt, qui contient l'épitope ciblé par ton anticorps primaire.  [...]

[biologie moléculaire] Info sur le slot blot

Imagine que tu aies plusieurs patients et que tu veuilles tester la 14-3-3 histoire de voir s'il ils ont un Alzeimer (je ne suis pas sur qu'il existe un anticorps contre cette molécule, mais c'est histoire d'avoir un exemple). Tu fais les extraction et purifications nécessaires du CSF et pour chaque patient, tu déposes un spot de ce que tu as obtenu sur ta membrane.  [...] L'avantage su slot blot, c'est bien sur la rapidité de la manip. Par contre, le western blot apporte une information supplémentaire, la masse de la protéine liée par l'anticorps. Cela peut être très utile pour éviter d'avoir des faux positifs. si tu cherches une protéine de 30 kDa et que ton western révèle une protéine de 80 kDa, tu sais que c'est un faux positif. En slot blot, tu ne le sauras pas.  [...]

[Biologie Cellulaire] Notion de contrôles, contrôles isotypiques, culture cellulaire

Pour moi, il s'agit d'un contrôle permettant la vérification de l'absence de fixation non spécifique d'un anticorps, que l'on effectue en incubant une IgG dirigée contre une protéine jamais exprimée dans la cellule qui nous intéresse. Ainsi, on vérifie l'absence de fixation non spécifique et donc la spécificité du marquage effectué avec l'anticorps dirigé contre la protéine que l'on veut localiser.  [...] Bah si l'anticorps qui cible votre protéine d'intérêt est un IgM, l'anticorps contrôle doit être un IgM. Si il s'agit d'un IgG, le contrôle doit être un IgG.  [...]

[Biologie Moléculaire] Co-immunoprecipitation

Comme le titre l'indique je souhaiterai réaliser une c-immunoprécipitation afin de montrer l'interaction de deux protéines in-vitro. N'ayant absolument jamais réaliser ce type d'expérience, je souhaiterai savoir si cela est compliqué Ensuite, j'ai une question technique.  [...] lors de la précipitation de notre protéine cible avec un anticorps, faut il auparavant fixer notre protéine avec les autres protéines qui interagissent avec (je me dis que sans cela les interactions sont peut être trop faible pour permettre de visualiser sur western blot).  [...]

biotopes artificiels pour notre production de bactéries multirésistantes ?

Pour élaborer un médicament, on commence par identifier une protéine associée à une maladie humaine. Ces protéines sont connues sous le nom de cibles. Quand il se confirme qu'une cible joue un rôle dans une maladie, on la passe alors à un crible à haut débit afin de trouver un composé chimique ou un anticorps qui s'attache à la cible ou la touche de manière à modifier la maladie.  [...] Une fois que les composés chimiques ou les anticorps ont été identifiés de la sorte, ils sont optimisés afin d'améliorer leur innocuité et leur efficacité. Le composé chimique ou l'anticorps qui résulte de ce processus devient alors un médicament candidat.  [...]