• Forum - Anticorps, Molécule, Intérêt

[Biologie Moléculaire] Immunohistochimie/ Immunomarquage

En gros tu as une plaque multi-puits de faible volume où tu déposes un anticorps qui reconnaitra ta molécule d'intérêt.Il se colle sur le fond du puits.  [...] Pose de l'anticorps primaire,rincage, anticorps secondaire couplé à une enzyme, rincage. Ensuite, tu ajoutes le substrat et atteint que la réaction se fasse. Si ta molécule d'intérêt était présente et que tous les autres Ac ont réagi alors l'enzyme couplé au secondaire réagit avec le subtrat et ta solution devient jaune.  [...]

[Biochimie] Ihc

quel est l'intérêt d'utiliser un anticorps primaire puis un anticorps secondaire pour marquer une molécule Ce n'est pas mieux d'utiliser un seul anticorps.  [...] De plus, je ne comprends pas la notion de témoin négatif. On prend des anticorps primaires de même type (isotype) que ceux utilisés dans l'expérience mais non spécifique à l'antigène considéré. Mais si ces anticorps sont isotypes, ça veut dire qu'il vont fixer le même antigène non Donc, je ne vois pas très bien la notion de témoin négatif obligatoire en IHC.  [...]

Immunohistochimie

Après, pour avoir des protocoles précis, il faut voir les fabricants d'anticorps, d'automates et les adapter au désidératas du lecteur... Mais dans les contexte actuel avec les velléités d'accréditation, je suis convaincu qu''il ne faut pas chercher à jouer les apprenti sorcier et se fier au fabricants qui sont eux certifiés IVD et surtout de proscrire les techniques manuelles (à regret...).  [...] Les solutions, maîtriser la fixation (temps notamment...), utiliser des protéases, pour info, la prière n'est pas efficace. Les bruits de fonds viennent ensuite, (avec les anticorps commerciaux on peux espérer l'absence de marquage on spécifique) on peut alors agir sur la concentration en anticorps, le temps d'incubation et les rinçages.  [...]

Anticorps et petite molécules

J'aimerais savoir à quel points les anticorps sont capables de reconnaitre et de fixer une molécule je veux dire, est-ce qu'il y a une limite inférieur de taille Je pose la question parce que j'ai entendu parlé d'un domaine de la recherche contre la cocaïne basé sur la création d'anticorps anti-cocaïne.  [...] Même si je vois pas trop l'interet d'une telle recherche (après tout, bloquer la cocaïne n'enleve pas le manque...), un ami m'affirmait que de tels anticorps ne peuvent s'obtenir in vivo, seulement in vitro. Et ceux, parce qu'une molécule de cocaïne est trop petite pour qu'un organisme puissent synthétiser des AC dirigés contre elle. Qu'est-ce que vous en pensez.  [...]

[Biologie Cellulaire] Notion de contrôles, contrôles isotypiques, culture cellulaire

Pour moi, il s'agit d'un contrôle permettant la vérification de l'absence de fixation non spécifique d'un anticorps, que l'on effectue en incubant une IgG dirigée contre une protéine jamais exprimée dans la cellule qui nous intéresse. Ainsi, on vérifie l'absence de fixation non spécifique et donc la spécificité du marquage effectué avec l'anticorps dirigé contre la protéine que l'on veut localiser.  [...] Bah si l'anticorps qui cible votre protéine d'intérêt est un IgM, l'anticorps contrôle doit être un IgM. Si il s'agit d'un IgG, le contrôle doit être un IgG.  [...]

[Immunologie] Anticorps relevant

dans un contrôle négatif, on utilise plutôt une anticorps irrelevant (c'est à dire qui ne reconnait rien qui a un intérêt pour toi on pourrait le traduire par non pertinent), en immunomarquage on utilise plutot le terme de contrôle isotypique. ex si tu veux révéler une protéine X, et tu utilises un marquage direct avec un anticorps IgG1 de souris anti-X couplé FITC, tu utilises en contrôle une IgG1 de souris irrelevante-FITC (qui ne reconnait rien dans ton système, ces molécules sont vendues sous le nom de contrôles isotypiques).  [...] oui à ce moment là l'anticorps contre la protéine d'intéret est l'anticorps relevant. mais enfin c'est un peu bizzare comme langage.  [...]

[Biologie Moléculaire] Technique GST-Pull Down

le pulldown après c'est parce qu'on utilise des billes couplées à des anticorps qui fixent la GST et sa protéine fusionnée, on peut laver puis éluer pour concentrer la protéine d'intérêt.  [...] c'est ça. Le truc c'est qu'il n'existe pas toujours d'anticorps dirigés contre les protéines d'intérêt ou d'anticorps bien spécifiques alors que ceux qui reconnaissent la GST le sont. Il existe aussi des techniques pour récupérer la protéine sans le tag à la fin, par exemple en clonant un site de restriction SapI entre le cDNA de la prot et celui de la GST.  [...]

AIDE :sos: : les techniques d'étude en biologie

l'histologie est une étude morphologique d'un tissu (formes cellulaires, densité, etc...) puis tu descends dans les échelles avec la cytologie (étude des cellules, formes). enfin, l'autoradiographie te permet de visualiser la présence et la localisation d'une molécule en particulier, que tu auras préalablement marquée par un anticorps ou un élément radioactif.  [...] pour l'autoradiographie, une molécule radiactive (anticorps radiomarqué fixé à la protéine cible, atome radioactif incorporé dans ta molécule cible) emet un rayonnement qui noircit la pellicule photo. Développé dans le noir, seul la présence des éléments radiactifs sera visible sur la photo.  [...]

L'athérosclérose : nouvelles pistes

On ferait produire des anticorps dirigés contre ce récepteur en injectant une molécule ressemblant au récepteur, càd le récepteur (qui ne déclenche pas de réaction immunitaire car c'est du soi) + une molécule antigénique.  [...] 2) Lorsque le LB reconnaît le complexe récepteur scavenger-molécule antigénique, est-ce que ultérieurement ces LB mémoire pourront reconnaître le récepteur seul Puisque la molécule antigénique introduite sera éliminée du corps, il ne restera que le récepteur exprimé constitutivement.  [...]

Causes du diabètes de type 1

- Quand l'antigène, la molécule ou l'être vivant qui déclenche la réaction spécifique, arrive au niveau d'un ganglion lymphatique, il se retrouve fixé à la membrane des lymphocytes du clone (ou des fois, de plusieurs, mais peu nombreux, clones) qui a l'anticorps spécifique de cet antigène.  [...] L'organisme va réagir (c'est anormal) contre cette molécule. lymphocytes qui se multiplient/différencient et sécrétion massive d'anticorps. alors que normalement il ne doit pas le faire.  [...]