• Forum - Anticorps, Lapin, Révélation, Souris, Chèvre

même marquage immunofluorescence dans le vert et le rouge

En fait, je pense savoir à quoi c'est du, j'ai re-vérifié les anticorps secondaires et il s'avère qu'il y a deux anticorps anti-souris dans la boite. un produit chez la chèvre et l'autre chez le lapin. le hic c'est que sur les aliquots, la provenance n'est pas indiqués.  [...] . Donc je pense que cette fois-ci j'ai du pioché le mauvais aliquot. lapin anti-souris rouge qui va être reconnu par mon autre secondaire chèvre anti-lapin vert et donc donner le même marquage. Ceci m'amène à une autre question. mon secondaire chèvre anti-lapin vert n'aurait-il pas du reconnaitre mon anticorps primaire quand même ou est-ce que ça peut s'expliquer par l'affinité et la compétition entre les deux anticorps.  [...]

[Biologie Moléculaire] Western blot et interférences?

Peut etre que, tout en augmentant la résolution, tu pourrais tester en parrallèle un anticorps anti bsa pour etre sur que la bande que tu observes comigre bien avec ce que tu penses etre de la bsa. Je vais peut etre dire des bétises mais si tu utilises des sérums bovins (à moins que ce soit autre chose) tu auras donc des anticorps bovins anti bsa mais si ton anticorps primaire anti PDH n'est pas d'origine bovine (en général, c'est souris, lapin ou chévre), tu réveleras avec un anticorps secondaire (souris, lapin ou chévre) qui ne reconnaitra pas les anticorps anti bsa d'origine bovine. A moins que tu révele ta protéine différemment.  [...] Pour répondre à la question, je révèle mes immunoblots avec des sérums de patients pour voir s'ils ont des anticorps anti PDH. D'où la question que je m'étais posée, est-ce qu'un humain peut synthétiser des anticorps anti-BSA.  [...]

Obtention d'anticorps

Les anticorps polyclonaux sont obtenus en injectant à un animal (singe, chèvre, rat, souris, ou lapin, peut-être qu'il y en a d'autres) un antigène.  [...] * Par phage-display = une banque d'ADN (plusieurs millions de séquences codants pour des anticorps tous différents) est transfectée dans des phages, de telle sorte que ceux-ci présentent (=display) les anticorps sur leur capside. On infecte cette banque de phage dans des bactéries (1 bactérie = 1 phage), on induit la formation de phages dans ces bactéries, puis on les teste tous, par FACS ou par ELISA.  [...]

[Biochimie] Test de grossesse

Mais la source sur le fait que la fenêtre de controle détecte la sous unité alpha HCG sont du niveau 3ème (pour le chapitre des anticorps) donc peut être que tout est schématisé et qu'en faite d'autres facteurs entre en jeu, que le site n'a pas évoqué car le but n'était pas d'expliquer en détaille comment fonctionne un test de grossesse.  [...] Il existe d'autres controles. Souvent il s'agit d'anticorps anti espèce (genre chevre anti lapin) pour valider ton test. (l'ac antihcg est issu du lapin et on utilise un ac de chevre anti-lapin). Il apparait une sorte de petit v dans une fenetre dédiée.  [...]

[Immunologie] Protocole ELISA

La détection des anticorps se fait par test ELISA. Le sang des poissons est récupéré par la veine caudale et mis à coaguler une nuit à 4°C. Le sérum est ensuite récupéré et dilué. Les antigènes proviennent des parasites. L'anticorps de détection est une immunoglobuline anti-loup obtenue en injectant des antigènes de loup dans un lapin.  [...] De la même façon, l'anticorps secondaire est une immunoglobine anti-lapin obtenue en injectant des antigènes de lapin dans une chèvre (anticorps disponibles dans le commerce). Cet anticorps secondaire est couplé à une enzyme peroxydas e obtenue chez le radis ou le raifort. test elisa.png.  [...]

[Immunologie] Marquage immunofluorescence

il ne faut pas oublier de réaliser un contrôle négatif avec des anticorps isotypes control IgG1 et IgG2a de souris en première couche.  [...] Rq. on est souvent conduit à faire ceci car beaucoup d'anticorps primaires sont faits chez la souris. sinon effectivement utiliser des sources provenant d'espèces différentes est encore mieux.  [...]

[Immunologie] Test Elisa

Pour ce faire on a coaté la plaque avec des anticorps polyclonaux de chèvre, on a lavé puis on a mis notre solution d'Ac de souris de concentration x, on a de nouveau lavé puis enfin on a mis des Ac anti-Ig de souris couplés à la peroxydase.  [...] Oui pour l'autre question tu as raison, l'anticorps de détection utilise son site de reconnaissance de l'antigène, qui est quoiqu'il arrive dans la partie variable, pour reconnaitre le déterminant antigénique correspondant qui lui va être situé dans la partie constante de l'autre anticorps.  [...]

Immunomarquage de la rétine du macaque

On rince de nouveau, puis on (peut, c'est pas toujours réalisé, cela dépend des expériences) saturer les sites de réaction de l'anticorps de chèvre avec un sérum de chèvre.  [...] On rince de nouveau, puis anticorps secondaire anti-IgG de chèvre (provenant du lapin cette fois). Vu que celui ci marque la fin des réactions, pas besoin de saturer après avec un sérum de lapin.  [...]

Anticorps anti-Ig humaine de chèvre

Je fais une recherche sur le test de dépistage sur le sida et le test ELISA utilise un anticorps qui s'apelle anti-Ig humaine de chèvre. J'aimerais savoir pourquoi ça vient d'une chèvre et pourquoi mettent-ils humaine Qu'est-ce que c'est en général.  [...] Tout simplement car les chèvres réagissent bien pour la production d'anticorps, comme les chevaux et les lapins, mais que c'est moins cher à entrenir que les cheveau et qu'au final tu a beaucoup plus de sérum avec une chèvre qu'avec un lapin, et donc plus d'anticorps.  [...]

[Biochimie] Comment éliminer un marquage immunocytochimique?

J'ai des cellules fixé et marquée avec des anticorps primaire souris/chèvre et secondaire fluo (488 et 555) pour deux marqueurs membranaires. Je dois les traiter de manière à dénaturer leur ADN (j'ai un protocole impliquant triton et HCl à 1N) pour en marquer des modifications.  [...] Evidement mon anticorps ciblant les modifications est murin, donc je dois trouver une technique pour enlever les anticorps fixés à la membrane.  [...]