• Forum - Amplification, Séquence, ADN

[Biologie Moléculaire] ADNc simple, double brins et PCR

Je ne comprends pas bien ton blocage étant donné que tu sembles avoir compris le principe de la PCR. ADN simple brin ou double brin, cela ne change presque rien pour la PCR, hormis le fait que la première amplification aura lieu sur une seule séquence d'ADN, alors qu'avec de l'ADN double brin on en a deux.  [...] une séquence d'ADN et sa séquence complémentaire. A partir de la deuxième amplification, on a deux séquences d'ADN qui sont amplifiées, on est alors dans le schéma classique de la PCR.  [...]

[Biologie Moléculaire] Explications rapides sur la PCR

C'est LA base de la PCR, l'ADN polymerase a besoin d'une amorce pour commencer la réplication de l'ADN. L'idée de génie est de créer cette amorce pour amplifier un morceau d'ADN souhaitée. Comme il y a deux brins sur une molécule d'ADN, il en faut deux.  [...] Enfin, quelqu'un peut-il me faire un petit résumé rapide des avantages / inconvénients / spécificité de ces deux méthodes ( amplification par plasmide, et amplification par PCR ).  [...]

[Génétique] PCR, marqueur biologique

La PCR Permet l'amplification de multiples copies d'une séquence donnée d'ADN.  [...] 2. Hybridation des amorces qui encadrent la région que l'on désire amplifier (région d'environ 1*000 bases). Les amorces sont mises en excès -. 50-60°C.   [...]

transgenese

L'ADN nu contenant la séquence thérapeutique est injecté sous forme de plasmide bactérien dans le tissu cible. Il est ensuite intégré dans les cellules par des mécanismes encore inconnus.  [...] La pratique en soit est assez simple mais fastidieuse. Il faut injecter l'ADN dans le noyau de la cellule à l'aide d'une minuscule pipette. Tout se fait à la moins avec un amplificateur de mouvement et un microscope, et il faut donc être très doué.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage/ synthèse ARN/ ADN

une autre à laquelle j'ai pensé, la technique PCR qui permet l'amplification d'une séquence d'ADN.  [...] L'objectif est de synthétiser un ARN guide pour l'utiliser dans la technique CRISPR/Cas9, comprenant une séquence précise complémentaire à la séquence d'ADN cible (crRNA).  [...]

Technique pCR choix amorces

On doit réaliser une amplification par pCR d'une séquence ADN présentée partiellement dans le sens 5'-3'.  [...] peut être qu'en regardant cette animation très bien faite sur le principe de la PCR, le choix du bon couple te paraitra plus simple.   [...]

[Divers] La série "Dr House"

Dans ce cas, en théorie, on pourrait tenter d'amplifier une séquence (d'ARNm par exemple) présente chez les bactéries mais pas chez nous pour voir si cette femme a un cancer de la langue par ex.  [...] Après, en pratique, je doute que le nombre de bactéries présentes sur la cuillère permette de réaliser ce test, même s'il est vrai que le principe même de la technique est d'amplifier les séquences, car la technique a très probablement un seuil de sensibilité.  [...]

[Biotechnologie] Principe de la PCR

effet, si la séquence d'intérêt est présente dans l'extrait d'ADN, il est possible de sélectivement la répliquer (on parle d'amplification) en très grande.  [...] séquences déterminées et les amplifier par réplication à des dizaines de milliards de copies. La réaction terminée, la quantité extrêmement faible.  [...]

[Biologie Moléculaire] Séquençage problématique

Je fais mes PCR sans problèmes, amplification de la bonne zone, quantité d'ADN (quantifié au nanodrop correct), mais les résultats me posent quelques problèmes. J'obtiens bel et bien ma séquence d'intérêt. MAIS.  [...] Si aprés vérification tu ne trouves pas le polymorphisme et en plus il affecte l'acide aminée correspondant et bien on pourrait commencer à penser à une mutation génétique (mais peu probable dans ton cas puisque à la base tu ne recherche pas de mut).   [...]

[Biologie Moléculaire] Gène GH-25

- Dans ton article, ils ont commencé par une analyse bioinformatique de séquence d'ADN de différentes espèces de l'arbre de la vie, puis ils ont séquencé en particulier, après amplification par PCR, le gène GH25 présent dans ces espèces. Comme il s'agit d'abord d'une analyse informatique, ils ont du dans un premier temps identifier si les séquences autour de leur gène fétiche étaient déjà connues pour être la/les séquence(s) codante(s) de gène(s) connu(s).  [...] ..), pour lequel on trouvera beaucoup plus d'annotation de génome (puis qu'il y aura plus d'espèces incluses, dont certaines sont des modèles d'études des scientifiques, donc bien mieux annotées). Et c'est comme ça qu'à partir d'un séquence d'ADN dont on ne sait rien, on peut prédire si cela correspond à un gène connu (étudié et séquencé dans une autre espèce du même règne) ou pas.  [...]