• Forum - ADN, Site, Restriction

Enzyme de restriction

Et est ce qu'elle coupe l'ADN etrangé avec son site de restriction = son propre ADN.  [...] Bonjour, au temps pour moi j'ai confondue en fait, merci pour la reponse.   [...]

transgénèse végétale

Dois-je prendre des primers qui ont un site de restriction bien spécifique pour pouvoir mettre l'ADN amplifié dans le vecteur ti désarmé après Quel doit être la longueur du primer environ.  [...] Le promoteur 35S faut-il que je le clone aussi dans le vecteur ou est il généralement déjà dans les plasmide ti désarmé avec un site polylinker Si quelqu'un connait un site ou il y a un schéma ce serait super.  [...]

[Biologie Moléculaire] Erreur de taille sur SDS-PAGE

Deuxièmement je voudrais savoir si il fallait un distance minimum de part et d'autre d'un site de restriction pour que l'enzyme clive le double brin d'ADN. Là aussi je précise mon idée. J'ai un site de restriction qui se trouve 71pb avant la fin du fragment d'ADN et je voudrais savoir si c'est possible que l'enzyme ne le vois pas.  [...] Pour le SDS je ne sais pas.Mais pour la restriction, il ne devrait pas y avoir de problème.On peut bien creer des fragment PCR avec juste un site de clivage de chaque coté et les cliver ensuite.Je sais pas si mon exemple et très clair, mais toujours est-il que je suis quasi sur que ça ne posera pas de problème.  [...]

[Biologie Moléculaire] the Genome walking method

3) Ligature en condition dilluée à 4°C pour favoriser l'auto-circularisation des fragment d'ADN (même site de restriction ).  [...] 4) Les ligatures servent ensuite de matrice à des PCR, les amorces utilisées seront divergentes pour amplifier l'ADN circulaire.  [...]

[Biologie Moléculaire] polymorphisme de restriction

je suis entrain d'étudier les polymorphismes de l'adn et je n'arrive pas à comprendre la défintion du polymorphisme de restriction (rflp). Dû a une mutation entraînant l'apparition ou la disparition d'un site de restriction.  [...] Il existe différentes enzymes de restriction qui reconnaissent chacune une séquence différente.  [...]

[Biologie Moléculaire] Pcr

Mais d'aprés ce que j'ai compris, c'est sur cette partie de l'amorce en trop ou qui ne s'hybride pas qu'on insère un site de restriction. Donc à cet endroit là, comment l'enzyme de restriction va t'elle couper si elle ne peut le faire que sur une région double brin et que le site de restriction correspond justement à une zone non hybridée ou simple brin.  [...] Au cycle suivant, l'amorce (antisens cette fois) va s'hybrider sur ce nouveau brin, complémentaire et antiparallèle du brin matrice. L'élongation permettra de produire un brin complémentaire a ce nouveau brin, jusqu'a son extrêmité 3' qui contient le site de restriction.  [...]

[Génétique] Choix amorces amplification portion ADN

5' CG CTCGAG CTT AGG GTG CCA TTT AAC 3'-. amorce avec 2 nucleotides au hasard, mon enzyme de restriction, et 18 nucléotides pour donner 26.  [...] - l'enzyme de restriction reconnait une séquence (souvent palindrome ) de l'ADN, s'y fixe, mais sous quelle forme est cette enzyme ( est-ce qu elle doit etre complémentaire du brin d'ADN, ou peut importe sa forme, elle reconnait le site, s'y fixe et ne doit pas s'apparier à l'ADN).  [...]

[Biologie Moléculaire] Sites de restrictions proches sur vecteur

Je voulais donc savoir si BamHI peut cliver son site de restriction lorsque celui ci se trouve trop à l'extrémité d'un fragment d'ADN Je précise aussi que les 6 bases de la séquence palindromique de BamHI sont bien présentes après clivage par XhoI.  [...] Les enzymes de restrictions sont des endonucléases. Il faut donc nécessairement au moins une base avant le site de restriction. En principe c'est quand même bien d'avoir 5 ou 6 bases pour que l'enzyme puisse bien s'orienter sur le site de restriction. Cela dit le tableau de IngDr donne que la restriction est faisable dans tes conditions. Essaie.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage avec plasmide

[Pour une PCR, on ajouter parfois des enzymes de restriction pour cliver l'adn, selon exactement le même principe décrit ci-dessus, il n'y a simplement pas d'insert de gène, donc pas de source de confusion any more normalement^^].  [...] 3. Trouver un site de restriction intéressant dans le plasmide qui soit absent du fragment d'ADN à cloner.  [...]

[Génétique] Principe de la technique RFLP

SVP si quelqu'un pourrai m'expliquer le principe de la technique RFLP ( le polymorphisme de longueur des fragments de restriction de l'ADN ), et comment il sert à l'etablissement des caryotypes ainsi que la detection de certaines maladies génétiques.  [...] Grace a un ordinateur qui pouvait reperer les possibilité d'abolition ou de creation de site de restriction sur une sequence d'ADN qu'on a rentre au prealable on pouvait en quelques sorte triché.  [...]