• Forum - ADN, Plasmide, Dégradation

[Biologie Moléculaire] Transformation levure

afin de transformer des levures avec un plasmide linéarisé+cDNA pour le recombiner, on a ajouté de l' ADN dénaturé (de thymus de veau) pour favoriser la transformation. Cet ADN aurait une fonction de carrier, mais je ne comprends pas trop comment ça marche, si qlq un peut m eclairer.  [...] cet ADN protège ton plasmide de la dégradation, car il est beaucoup plus abondant que le plasmide. Donc les nucleases vont en premier le dégrader.  [...]

trancription de l'ADN

- ils viennent d'une dégradation des ARN (pour les ADN je ne sais pas vraiment quels ADN pourraient êtres dégradés Oo celui des cellules mortes ADN exogène ).  [...] concernant la fabrication de novo des nucléotides par les cellules (ceux qui ne proviennent pas de l'alimentation ou de la dégradation des ARN et ADN déjà existants), voici deux schémas illustrant ces réactions complexes.  [...]

[Microbiologie] dégradation de l'ADN

1) j'ai constaté que L'adn de la Mycoplasma se dégrade rapidement, j'ai respecté le protocole d'extraction de l'adn mes réactifs sont en bon état je soupçonne l'interférence de la mutation de la souche dans ça est il possible de considérer que les mutations et/ou la présence d'une activité exonucléasique chez la souche soient impliqués dans la dégradation de l'ADN.  [...] merci d'avoir répondu à mes questions, mais maintenant on doit se focaliser sur la dégradation D'ADN presque tous mes collègues rencontrent le même problème pour la souche Mycoplasma meleagridis sachez qu'on travaille dans les normes, je ne sais pas franchement à quoi est dû spécialement pour cette espèce, je me suis posée la question % à la présence de Dnase mais si c'étais le cas ça ne marcherait pas pour toutes les espèces aidez moi s'il vous plaît sachant qu'on utilise la méthode d'extraction d'adn au phénol chloroforme.  [...]

[Génétique] Pourquoi les bébés naissent jeunes ?

- Une information non-altérée subsiste dans au moins une cellule de notre corps et c'est elle qui transmet ou qui corrige l'ADN transmi à la descendance (Dans ce cas, ma question est comment fait cette cellule ).  [...] Ce n'est pas la dégradation de l'ADN qui est en cause dans le vieillissement cellulaire car l'ADN ne se dégrade que très peu dans des conditions normales et il existe des systèmes de réparation. En fait, ce sont les extrémités des chromosomes, appelées télomères, qui réduisent à chaque duplication de l'ADN car l'ADN polymérase n'est pas capable de les répliquer.  [...]

empreinte à la DNase I

Sinon en général a 15 la DNase marche bcp moins bien qu'a 30°c si le complexe et faiblement attaché a l'ADN (donc ne le protege que aprtiellement) alors on aurait eut une différence, si ce n'est pas le cas, ca signifie que le complexe est fortement lié a la DNAse et protege efficacement l'ADN de la degradation.  [...] et d'ailleurs c'est pas plutot le complexe qui est fortement lié à l'ADN et pas la DNase qui est selon moi juste l'enzyme qui assure la dégradation de l'ADN non protégé.  [...]

CONJUGAISON Hfr et F-

porquoi une bactérie F-qui était capable de dégrader le maltose devient incapable aprés s'etre recombiner (phénomene de conjugaison ) avec une bactérie Hfr incapable de le dégrader.   [...] le facteur F passe en dernier et sachant qu'il y a transfert de tout un chromosome en particulier le gene responsable de la synthèse de la maltase (enzyme dégradant le maltosdans la bacterie F-. Je rappelle aussi le croisement Hfr * F- est caractérisé par une faible fréquence de passage de F- et une trés forte frequence de recombinaison.  [...]

[Biotechnologie] problème de smear

chaque fois que je fait migrer mon produit pcr je rencontre tj le probleme du smear dans mon gel et même le blanc negatif en contient, pour les échantillions, ceux qui arrivent à donner des bandes et ceux qui n'y arrivent pas (je suis encore en stade de mise au point donc...) tous donnent des traînés.   [...] pour la dégradation de ma matrice j'aurai pensé à ça si j'avais pas de smear dans le blanc mais meme le blanc negatif contient du smear, si non comment verifier la degradation d'adn.  [...]

[Biologie Cellulaire] Stabilité de l'ARNm

Quand tu veux exprimer une protéine dans une cellule, tu peux transfecter les cellules de manière à ce que ton ADN (plasmide le plus souvent) reste longtemps dans ta cellule. c'est la transfection stable. Tu as alors 2 possibilités. soit tu peux intégrer ton gène dans le génome cellulaire par recombinaison homologue, soit tu utilises des plasmides auto-réplicatifs qui ne s'intègreront pas (on appelle ça des épisomes).  [...] Enfin, la stabilité de ton ARNm produit dépend de son taux de production et de dégradation (c'est la même chose pour une protéine ou un ADN d'où la transition stable où il y a moins de dégradation de ton ADN). Plus un ARNm sera synthétisé dans de bonne condition, plus il sera stable, cad moins il sera dégradé.  [...]

[Génétique] problème d'extraction d'ADN

c'est pas mes premières manip j'ai effectué des extractions avec d'autres espéces et j'utilise bien évidament la protéinase k et le -4 degré pour une conservation à courte terme et j'ai pas eu ce type de problème et cette dégradation assez rapide d'ADN.  [...] Du génomique sur gel ça ne fait pas une seule bande mais un smear de hautes tailles. Après je n'ai pas vu dans ses dires que le profil de migration changeait après quelques jours. J'ai trouvé assez évasive la description de la dégradation.  [...]

virus

et bien en fait c'est assez simple, si je me trompe pas, un virus infecte une cellule, si c'est un retrovirus,il possede de l'ARN, il injecte son ARN dans la cytoplase où la transcriptase inverse reproduit ce brin en ADN double brin, de ce double brin est transcrit un nouvel ARN viral, il y a aussi des synthese d'element viraux qui vont permettre a un nouveau virus d'etre formé.  [...] Alors il ne faut pas confondre capside et enveloppe. Tous les virus ont une capside qu'ils acquierent lors de la phase d'assemblage (dans le noyau ou dans le cytoplasme en fonction des virus), y compris les bactériophages (donc dans le cytoplasme pour eux).  [...]