• Forum - ADN, Forme, Contamination

[Biochimie] Spectrophotomètrie : Les différentes technologies...

Ex. pour l'ADN tu peux déterminer sa concentration en mesurant l'absorbance a 260nm et la contamination par protéines en mesurant à 280.  [...] luminomètre. ici il n'y a pas d'excitation. En gros tu mesures ( comptes ) de facon non spécifique (cad pas en fonction du spectre) l'émission de photons. EX. lorsqu'elle est oxydée par la luciférase en présence d'ATP, la luciférine émet un photon. Tu peux alors doser l'ATP indirectement en comptant les photons issus de l'oxydation enzymatique de la luciférine par la luciférase.   [...]

Informations sur ce fameux test vih

Enfin, je fini avec ce qu'a dit toothpick-charlie. il y a un seul cas de guérison d'un adulte pour le VIH. la patient de Berlin. Mais ils semblent également qu'il soit considéré comme guérit les nouveau-nées contaminés à la naissance et immédiatement traités (donc la mère est déjà porteuse du VIH).  [...] Oui, il est également possible de détecter l'ADN du virus, principalement en ciblant ses zones conservées. Et dans ce cas, la détection est encore plus fine, et surtout peut être réalisé plus tôt après la contamination éventuelle.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN bactéries lactiques

Tu peux utiliser les kits de chez Qiagen (Maxi/Midi kit QIAGEN RNeasy (Références 75162 et 75142, respectivement). Afin de minimiser la contamination par l'ADN génomique, la préparation est digérée sur colonne par la DNase RNase-free (QIAGEN, référence 79254).  [...] Je remonte brièvement ce fil à la surface pour donner quelques nouvelles. J'ai enfin réussi à extraire une quantité suffisante d'ARN de mes bactéries (voire même trop, je suis obligé de diluer ^^) en utilisant la méthode au tri-reagent (équivalent du trizol) et au phénol-chloroforme de Milohanic et al. modifiée.  [...]

Plasmide et gène LacZ

La première étape de l'utilisation des plasmides est la détermination des bactéries transformant (qui ont intégré un plasmide non recombinant) et des bactéries transformant recombinant (qui ont intégré des plasmides recombinant, i.e. contenant le gène luc), par rapport aux bactéries non transformant.  [...] Une fois les bactéries sélectionnées, il va falloir purifier les vecteurs, afin que l'ADN soit exempt de toute protéine, de tout ARN ou d'une quelconque contamination chimique. Puis, avant de commencer les expériences proprement dites, on transfecte les plasmides dans les cellules qui nous intéressent.  [...]

[Biologie Moléculaire] Nettoyage d'ARNs & Transfert de protéines

Pour l'extraction d'ARN, la contamination vient bien du fait que j'ai utilisé du tissu congelé (jeté dans le tampon RLT à 20°C). Le commercial m'a conseillé de chauffer les échantillons juste 5 min à 30°C après broyage puis de bien vortexer pour dissoudre les sels.  [...] Par contre, j'ai des soucis sur un protocole d'extraction d'ARN issus de plasma où là j'ai des problèmes de contamination en sels et des DO vers 230 problématiques.  [...]

[Biologie Moléculaire] Contamination transformation

Donc je suis persuadée qu'il s'agit d'une contamination, d'autant plus que la coloration du milieu après mise en culture n'est vraiment pas normale...mais de quoi.  [...] Je ne récupère aucun ADN plasmidique...il n'y a pas forcément d'ADN plasmidique dans des bactéries... Ce qui veut dire que ma contamination provient d'une bactérie résistante à l'antibiotique mais qui n'a pas intégrer un plasmide parasite issu du labo porteur de la résistance Ampi.  [...]

[Biologie Moléculaire] Mesure de pureté d'une préparation d'ADN aberrante?

Or normalement, une valeur aux alentours de deux témoigne d'une assez bonne pureté, et une valeur inférieur à 1.8 d'une contamination en protéines. par contre je ne vois pas du tout à quoi peut bien correspondre un rapport aussi haut.  [...] J'avais pensé à une contamination par autre chose que des protéines, mais je vois mal ce qui a pu contaminer en absorbant à 260 pile, et ni à 280 ni à 320. Et surtout qu'est-ce qui peut contaminer mon ADN, à part des protéines Des restes de la lyse des hépatocytes Un truc de la solution tampon.  [...]

[Microbiologie] Gélose Mac Conkey Sorbitol

Oui c'est bizarre comme résultat, parce que la couleur rose du milieu est due a la présence de l'indicateur de pH le rouge neutre, et le virage de la gélose au jaune-orangé est dû a une alcalinisation du milieu, peu être qu'il y a eu une contamination de la gélose par une autre bactérie et qui alcalinise le milieu.  [...] Mais quand a dire comment cela est possible, je pense que la duré d'incubation a été prolongé, et ceci pourrai expliquer cela, car soit la souche en question à métaboliser un substrat qui a alcaliniser le milieu ou alors il y a eu une contamination par une autre bactérie qui a alcaliniser le milieu, tu as remarqué la présence d'autres formes de colonies outre celle en rose.  [...]

Correction devoir - Le monde microbien , biotechnologie, antibiotiques …

on évite toute contamination virale puisque l'on évite que le gène de la bactérie ne se transforme, ce qui provoquerait la fabrication d'hormone inefficace par la fabrication de deux lots, leurs contrôle et la fermentation.  [...] LA chose la plus importante a faire pour eviter la resistance aux antibiotiques (loin devant les 3 citées) est de prescrire systematiquement une combinaison de au moins 2 antibiotiques (de famille differente). De cette maniere, tu n'auras pas l'apparition d'une resistance due a une mutation spontanée car la frequence d'une double mutation (equivalente a une resistance au 2 ATB) est bien trop faible.   [...]

Contamination qPCR

Quel conseil avez vous à me donner pour trouver la cause Ce qui me fait perdre la tête c'est que si c'est vraiment une contamination c'est forcement ma bactérie qui est dedans vu que c'est du taqman.  [...] changer de lot de pipettes, de paillasse par exemple. Cônes filtrés Sinon, invoquer la divinité de la PCR parce que des fois les contaminations sont inexplicables et peuvent disparaitre du jour au lendemain.  [...]