• Forum - ADN, Fiable, Protéines, Solvant

[Biologie Moléculaire] Petites questions autour de l'extraction d'ADN plasmidique !

On nous fait ensuite calculer la pureté de notre adn... On nous rappelle que si le rapport est. 2 alors c'est qu'il reste trop de solvant... Et si il est. 1.8 c'est qu'il y a des protéines.  [...] Pour en avoir déjà fait l'expérience, la transfo ou les PCR avec des ADN purifiés dans lesquels il reste trop de solvant ca marche moyen (le solvant gène voire inactive les enzymes).  [...]

[Divers] Vivant??

les chromosomes sont des outils qui permettent à ces etres vivant de se maintenir en vie, ils sont en fait le support de l'information génétique (synthèse de protéines, multiplication par duplication et réplication en cours de mitoses...).  [...] A l'intérieur de chaque organite, il y a bien sûr le solvant habituel, l'eau, dans lequel baignent des protéines et différentes petites molécules. Il y a aussi de l'ADN dans le noyau, les mitochondries et les plastes. Et chaque organite a un rôle particulier qui dépend des molécules qu'il contient, surtout de ses protéines.  [...]

[Biochimie] Problème de taille

J'ai une petite question, en révisant mon cours de caractérisation protéique j'ai trouvé que la cristallographie n'est pas limitée par la taille de l'échantillon contrairement à la RMN qui se limite à des macromolécules de 30KDa, donc j'aimerai comprendre pourquoi l'une est limitée alors que l'autre ne l'est pas.  [...] En effet la cristallographie n'a théoriquement pas de limite taille. On arrive à cristalliser des petites molécules, des macromolécules biologiques (ARN, ADN, protéines), des complexes de macromolécules et même des virus. Cependant résoudre la structure de complexes ou de virus n'est pas chose facile et on est souvent limité par la limite de résolution du fait qu'avec de gros objets on a d'important volume de solvant et donc un empilement cristallin un peu moins périodique.  [...]

[Biologie Cellulaire] Effet d'un Solvant Organique sur la Membrane Plasmique

L'autre fois, il explique que l'éthanol (Solvant Organique n'est ce pas) solubilise lipides + protéines membranaires.  [...] Un solvant organique solubilise-t-il donc seulement les lipides ou aussi les protéines.  [...]

Solubilité

solubilitée extraction par solvant...un soluté est plus soluble dans un solvant que dans un autre donc on peut l'extraire facilement, chromatographie...ca permet la séparation de proteines par exemple en fonction de leur solubilité, phénomène de saturation.  [...] ..precipitation qd la concentration en substance dissoute est trop importante, relarguage...trop de sels dans une solution de proteines vont faire precipiter ces proteines elles sont dénaturées. Les exemples sont tres nombreux en biologie et en chimie, a toi de choisir.  [...]

[Génétique] kit qiagen

L'ADN interagissant avec la silice par des interactions polaires, un solvant polaire comme l'eau élue l'ADN (certain kit Qiagen utilise simplement de l'eau pour l'élution), pour les lavages, l'alcool permet ainsi le maintien de l'ADN sur la silice.  [...] J'utilise le même type de kit mais chez Sigma et ils sont aussi avares en infos... Mais en fait à mon avis c'est simple. regardes les protocoles dits classiques d'extraction de plasmides et il n'y a pas de mystères les kits sont fait avec les mêmes produits.   [...]

[Biologie Cellulaire] protéines dans la phase organique?

J'aurai voulu savoir si quelqu'un aurait pu m'eclairer sur le fait que les proteines lors d'une extraction au phenol chloroforme migrent dans la phase organique alors qu'elles sont le plus souvent cytosolubles... Ne devraient elles pas se retrouver dans la phase acqueuse.  [...] je n'ai jamais vu de proteines aller dans la phase organique... mais en revanche il peut se produire parfois une inversion de phase (la phase organique passe au dessus).  [...]

[Biologie Moléculaire] Pcr pour clostridium perfrigens

voila je prépare une thèse sur le toxinotypage de clostridium perfrigens par méthode Pcr, je compte faire des prélèvements sur cadavres frais (poulets), isoler et identifier puis conserver l'adn bactérien à -20° le temps de recevoir mes réactifs pour lancer ma PCR.  [...] je suis un peu perdue et j'aurai besoin de connaitre votre avis sur le meilleur protocole, dois je prélever une colonie bien déterminée et la conserver dans un milieu au congélateur je ne sais pas comment je peux congeler pour que je puisse, ensuite (une fois que j'aurai tout le matos) lancer ma pcr.   [...]

Extraction du plasmide

Une RNase est une protéine qui va dégrader les ARN et non pas les RNase. La RNase utilisée pour la Miniprep sert à obtenir réellement de l'ADN et pas un Mix ADN/ARN comme tu peux l'avoir si jamais ta RNase est peu active ou inactivée.  [...] Par contre normalement ton tampon d'élution est une solution qui va lier l'ADN avec plus d'affinité que la colonne ne retiens ton ADN (puisque tu as fait plusieurs rincage, il fallait que la colonne retienne l'ADN mais laisse passer les solvant, sur des principes d'affinité, et comme la tu veux récupérer ton ADN, il faut le décrocher de cette colonne avec quelque chose qui a encore pluss d'affinité pour l'ADN que la colonne).  [...]

Biochimie : Pourquoi a-t'on besoin d'éthanol pour extraire le fructose du citron?

Je pense que l'éthanol sert à se débarrasser des protéines et des nucléotides (ADN, ARN) qui perdront leur solubilité et précipiteront plus facilement à la centrifugation.  [...] Il y a aussi beaucoup de références à des mutations, et je ne sais plus quel terme en ron renvoyant au fait que les gènes bactériens peuvent coder pour différentes protéines (ce n'était pas intron ou exon..) mais je n'ai pas approfondit le sujet, alors si quelqu'un peut venir éclairer un peu.  [...]