• Forum - ADN, Extrait, Kit, Méthode

[Biotechnologie] An efficient TALEN mutagenesis system in rice

L'ADN chromosomique (hors plasmides, etc.) provenants des individus/plants résistants à l'hygromycine est extrait avec une méthode/kit rapide spécifique pour plantes (ex. Tiangen TM concernant l'équipe qui publie). La même méthode de digestion par PCR / enzymes de restriction que pour les chloroplastes est appliquée pour scanner les lignées transgéniques (Fig.  [...] Que cherches-tu en fait Ce que veut dire PCR/RE assay Auquel cas c'est méthode PCR/RE. Dans le contexte, son utilisation c'est pour le séquençage.  [...]

Kit extraction dna

Je fais souvent l'extraction avec la méthode classique phénol-chloroform et maintenant je veux utiliser ce kit pour l'extraction.  [...] Aussi est ce que la qualité d'ADN extrait est plus bonne avec le kit que la méthode phénol chloroform.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction adn phénol/chloroforme

Bonjour à tous.J'ai récemment fais un tp de biochimie (L2 SV),consistant a extraire l'adn a partir de cellules de foie de porc.Nous avons également utilisé de l'alcool a froid,du chloroforme et de l'isoamylalcool(qui favorise apparement la séparation des phases et la fomation de mousses).  [...] Je travailles sur des gonades de crustacés d'eau douce et afin de mettre en évidence la présence de microparasite, je dois extraire l'ADN et faire une PCR-RFLP.  [...]

[Biologie Moléculaire] Difficulté d'interprétation de gel d'électrophorèse

Sauf que voilà j'ai une bande en plus à 4000 pb pour tout le monde donc je ne comprend pas ce que c'est surtout qu'on dirait que la bande s'est dédoublée... Bref c'est étrange.   [...] - pour les non digérés. ça marche pas vraiment car si la bande à 4000 est l'état superenroulé alors il devrait être majoritaire et ça voudrait dire que le plasmide linéaire migre au même endroit que le plasmide circulaire ouvert.   [...]

Problème de PCRs

Peut être certaine personne ont rencontré le même problème que moi et pourront m'aider. Je travaille sur de l'ADN environnemental extrait avec le kit DNA plant mini kit de Qiagen. Sur cet ADN je voudrais amplifider le 16s/18s et ITS. Pour le 16s j'ai utilisé les amorces 16s8f (5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3') et 16s1541r (5'-AAGGAGGTGATCCAGCCGCA*-3') et pour ITS.  [...] Au niveau de concentrations de produits et du thermostat je pense qu'il n'y a pas de problèmes. Le problème que je rencontre est que mes PCRs marche une fois sur deux sans que je sache pourquoi. Mon témoin positif également ne marche pas donc ce ne viendrait pas d'inhibiteur dans mon échantillon.   [...]

[Biologie Moléculaire] Hydrolyse ADN

Je cherche à hydrolyser de l'ADN extrait de cellules cutanées humaines en nucléoside monoP. Je sais qu'il faut que je fasse un hydrolyse enzymatique mais je n'ai pas trouvé avec quelle enzyme...un un kit ferait encore mieux l'affaire.  [...] une méthode enzymatique ne te donnera que des polynucléotides je pense. La méthode HCl sépare les bases, les sucres et tout.  [...]

[Biologie Moléculaire] pb migration ADNg sur gel

Lorsque j'extrais l'ADN à l'aide d'un kit (FastDNA kit), je dose (prenons l'exemple d'un tube, DO=0,127 d'où une concentration de 317,5µg/mL d'ADN). Je dépose sur un gel d'agarose 0,8% 5µL d'ADN + 2µL de bleu de charge.  [...] Dans le cadre d'un projet, nous avons extrait de l'ADN d'un sol avec un kit d'extraction puis nous avons amplifier un gène spécifique à l'aide d'une PCR et enfin nous avons fait migrer les produits de PCR sur gel d'agarose avec plusieurs concentrations.  [...]

probleme DGGE

j'ai au préalable extrait l'ADN de mes échantillons grace à un kit commercialisé et fait pour l'analyse des sols, par la suite j'ai réalisé un produit PCR avec des amorces préalablement designé, j'ai également réalisé mon gel à gradient 45-65% d'acrylamide en suivant un protocoles pré-établi.  [...] Cependant lors de la migration seul le lader migre (seulement deux bandes...) mais les échantillons se diffusent dans les puits et ne migrent pas.   [...]

[Biochimie] extraction d'ADN et protéines

S'il vous plait,si vous pouvez m'aider, j'ai besoin d'un protocole pour effectuer une extraction d'ADN et des poteines à partir des poissons,pour un travail de fin d'études.  [...] Il y a pas mal de kit qui proposent des extractions d'ADN génomique à partir de tissus, il y a aussi la méthode phénol-chloroforme mais il faudra que tu lyse tes tissus avant... jette un coup d'oeil sur le site Current Protocols in Cell Biology ( http.//cda.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN par le Kit Qiagen

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN par le Kit Qiagen.  [...] je veux savoir si je pourrais utiliser le QIemp DNA Blood Mini Kit (Qiagen) pour extraire l'ADN à partir de tissu au lieu de QIemp DNA Mini Kit.  [...]