• Forum - ADN, Enzyme, Restriction

[Génétique] Thérapie génique: synthétiser le gène correcteur

Et le nombre et la taille des fragments d'ADN obtenus avec une enzymes de restriction dépendent du nombre de fois où la séquence reconnue par l'enzyme est répétée au sein de la molécule d'ADN. Et donc le choix d'une enzyme de restriction dépend de la taille des fragments que l'on désire.  [...] En bref l'enzyme de restriction va permettre le clivage de l'ADN par rapport au site de restriction. Ensuite les fragments d'ADN sont séparés (ou différenciés) par électrophorèse.  [...]

[Biotechnologie] Enzyme de restriction

2.maintenant si une enzyme de type deux ce met sur un fragment methylé elle ne coupe pas ma question c est d ou est venu la methylation de l adn vu que c est l enzyme de restriction qui est aussi methylase.  [...] pour la 4 je sais. les enzyme de restriction son specifique a un palindrome (sequence d'adn invariante reconnu par l'enzyme de restriction) donc si il ya mutation au niveau de ce palindrome specifique l'ensyme de restriction ne coupera plus a cette endroit de l'adn.  [...]

Enzymes de restriction

non les enzymes de restrictions coupent l'ADN bactérien, sauf celui de la bactérie qui synthetise naturellement l'enzyme. Cette bactérie peut etre protégée de la digestion soit par méthylation (mais ca ne permet pas de tout expliquer car bcp d'enzymes ne sont pas sensibles a la methylation), soit tout simplement parceque le site n'existe pas dans le génome.  [...] Vu que le génome bactérien est le même pour une espèce bactérienne, la méthylation va se faire sur certaines bases dont l'ordre est spécifique à cette espèce. Alors que pour d'autres espèces bactériennes la méthylation se fera dans un ordre différent. C'est l'emplacement de la méthylation qui change d'une espèce à l'autre et qui permet à l'enzyme de restriction de reconnaître l'ADN de la bactérie qui la (. -l'enzyme de restriction) synthétise.  [...]

[Biochimie] enzyme de digestion-restriction

On parle d'enzyme de restriction. Elle reconnaît spécifiquement des séquences d'ADN appelés site de restriction et induit une digestion de l'ADN.  [...] En PFGE, on peut parler d'enzyme de macro-restriction puisqu'elle génère des macro-fragments d'ADN (de + de 50 kb) résolus par électrophorèse en champs pulsé.  [...]

enzymes de restriction

La séquence d'ADN est le principal facteur qui détermine la spécificité d'une enzyme de restriction à couper l'ADN bicaténaire à un endroit précis.  [...] A noter que dans des applications de biologie moléculaire du gène impliquant les techniques courantes du génie génétique, la spécificité de coupure (on parle alors de fidélité de l'enzyme) peut être artificiellement altérée par les conditions dans lesquelles la digestion d'ADN s'effectue par chaque enzyme de restriction.  [...]

microbiologie (sens anti-sens)

merci pour votre reponse,oui effectivement, mais au fait vous m'avez mal compris, quand j'ai dit sens ou anti sens c'été par rapport a une cartographie de restriction, on a un brin d'ADN qui a été placé dans le plasmide (on sais pas si il a été placé dans le bon sens), on ajoute une enzyme de restriction ((ECOr, bamhI.  [...] on a deux plasmide, on va transplanter pour chacun un fragment d'ADN, on partique l'experience avec des Enzyme de restriction et ensuite on place les fragment dans un gel et on laisse migré(cartographie de restriction).  [...]

[Biologie Moléculaire] Pcr

Je ne comprend pas bien ta question. Pour construire un plasmide recombiannt tu as besoin de ta séquence d'intêret c'est à dire celle que tu veux intégrer dans le plasmide. Tu l'obtiens en l'amplifiant par PCR ou en digerant directement ton ADN par une enzyme de restriction.  [...] Ton fragement d'intêret peut possèder plusieurs sites de restriction spécifiques à l'enzyme utilisée. on obtient alors plusieurs fragments d'ADN dont un seul comprend le gène d'intéret. L'ADN plasmidique ne doit contenir qu'un seul site de restriction spécifique, au sein d'un gène de sélection.  [...]

extraire de l'ADN

Pour le reste, certaine enzyme de restriction sont effectivement incapable de couper l'ADN si celle-ci es méthylée au niveau du site de coupure (à l'inverse il existe des enzyme qui cliveny spécifiquement ces sites).  [...] Non, une enzyme de restriction coupe au niveau de la liaison 5'-3' phosphodiester entre 2 nucléotides sur les 2 brins, en aucun cas elles ne vont séparer les 2 brins d'ADN (c'est plus le rôle des hélicases par exemple).  [...]

Doc / bouquin cours [Bio Mol]

-. modification enzymatique de l'adn (adn polymérase enzyme restriction...).  [...] J'aurais bien mes cours à te passer si ça t'intèresse, on a fait pas mal de Génie Génétique (clonage, banque, extraction d'ADN etc...).  [...]

[Biologie Moléculaire] TP digestion ADN par enzymes de restriction par électrophorèse sur gel d'agarose

Bonjour, merci. Oui bien entendu je sais ce qu'est une enzyme de restriction. Une enzyme de restriction reconnait un site de restriction généralement palindromique sur l'ADN une fois reconnu elle clive. Alors j'utilise un ADN de phage lambda c'est de l'ADN circulaire il me semble mais qu'elle est le rapport avec la migration et oui je sais aussi c'est quoi l'électrophorèse sur gel d'agarose c'est la migration de fragments d'ADN ( dans mon cas) du fait qu'on exerce un champs électrique l'ADN étant chargé négativement va migré du coté positive au niveau de la matrice d'agarose les fragments les plus courts migreront plus vite et plus rapidement mais sa m'aide pas pour l'analyse car on a des bandes linéaire et non pas circulaire.  [...] Et ensuite en comparant les profils de restrictions de chaque enzyme et des combinaisons de plusieurs enzyme tu peux déduire comment les sites de restrictions se trouvent les uns par rapport aux autres sur ton ADN de phage du départ.  [...]