• Forum - ADN, éléve, Concentration

[Biologie Moléculaire] Concentration ADN plus élevé au picogreen qu'aux UV (spectrométrie)

J'ai fait plusieurs quantifications d'ADN et voilà que la concentration de mes échantillons est plus élevée au picogreen qu'aux UV. Voici comment je procède.  [...] Lorsque je compare les concentration de mes ADNs mesurées avec les deux technologies, alors qu'on devrait s'attendre à avoir une concentration plus élevée avec le UV c'est plutôt le contraire qui se produit et ce avec tous les échantillons (peu importe la provenance du client) que j'analyse.  [...]

[Biologie Moléculaire] probleme avec ma PCR

J'ai un ADN d'environ 400ng/ul. Et je fais des gammes de dilution avant PCR.J'ai une concentration finale d'environ 40ng/ul apres dilution.  [...] Ba si y en a pas assez tu peux avoir une amplification mais tu le vera pas sur le gel. En plus si c'est de l'ADN génomique, ta concentration est élevé mais ton nombre de copie beaucoup moindre. Et inversement, petit fragment avec concentration identique, sa fait beaucoup de copies... Tu est à combien en MgCl2.  [...]

[Génétique] L'acidité de l'ADN

bin non ce n'est pas tous les acides fort qui ce dissossit totalemen,sa dépend aussi de sa concentration il peut etre tré concentré et il peut pas ce dissoudre totalement dans l'eau et sa ce peu que un acide faible de faible concentration mais dont alfha le degré d'ionisation tré élévé qui le laisse se dissoudre facilemen bon bref ma question est pour quoi l'ADN est il un acide faible meme s'il contient un acide phosphorique qu'on concidére comme acide fort mais dont son acidité diminue chaque fois qu'il pert un hydrogéne.et dans le cas de l'ADN..plz une réponse.  [...] Je voulais juste dire qu'au pH cellulaire (autour de 7 pour la majorité des cellules animales...) l'ADN est sous forme basique et est donc chargée négativement. C'est une propriété très utilisée en laboratoire. D'après les régles de la chimie, le pKa caractéristique d'un couple acido-basique détermine si la molécule est sous forme acide ou basique en fonction du pH.  [...]

[Biochimie] Absorbance de la molécule d'ADN

Expérimentalement, on montre qu'une solution d'ADN simple brin a une absorbance plus élevé qu'une solution de même concentration d'ADN double brin, lequel a une absorbance plus faible qu'une solution de dNTP.  [...] Ta réponse est meilleure que l'histoire du solvant. En fait, c'est juste une question de géométrie. Dans de l'ADN double-brin, les bases sont empilées et ce sont bien elles qui absorbent les UV. Si un photon recontre une base et est absorbé, cet empilement fait que la base qui est juste derrière celle qui a absorbé le photon est dans l'ombre et ne pourra donc pas être détectée, ce qui conduit à sous-estimer la concentration réelle.  [...]

[Biologie Moléculaire] CT variable

je suis en stage en M2, j'ai comme objectif de mesurer la variabilité de l'expression de certains gènes d'intérêt, pour cela j'ai dessiné des amorces qui ciblent ces gènes dans différentes espèces bactérienne. Je suis entrain de faire la validation des amorces j'ai donc fais une gamme étalon avec 5 différentes dilutions de mon échantillon ( facteur de dilution 2), et de différentes concentrations d'amorces dans le mélange réactionnel.  [...] j'ai eu du signal pour presque toutes les dilutions, les résultats de validation d'amorce que j'ai sont loin d'être satisfaisant du fait que les ct sortent de manière désordonné et très variable, c'est a dire vu que j'ai un facteur de dilution de 2 je devrais avoir deux ct de différence entre chaque dilution, et plus la concentration en ADN initiale est élevé plus le ct sort plus tôt.  [...]

Concentrer

Typiquement, pour de l'ADN, il existe des protocoles visant à le faire précipiter, puis après re-suspension dans un volume moins élevé, on obtient une solution plus concentrée.  [...] Généralement un ADN plus concentré est plus facile à manipuler, pour le diluer à la concentration voulue, pour faire des PCR plus efficaces.  [...]

[Biologie Moléculaire] Question concernant le cancer

j'aimerais bien que vous puissiez m'éclairer sur l'hypothèse suivente.est ce q'un cancer pourrait étre éradiqué si un gène suppresseur de tumeur comme Rb est présent en concentration anormalement élevé dans l'organisme humain.  [...] Ben l'expérience chez la souris à été faite, J-C Weill (c'est mon chef j'en profite) à proposé l'idée d'une souris transgénique avec plusieurs gènes P53, une équipe espagnol à réalisé la souris et montre que celle ci sont non seulement moins sujette au cancer (en fait nan déclare jamais je crois) mais en plus ont une durée de vie beaucoup plus longue que la souris wild-type.   [...]

[Physiologie] Cycle de la glaire cervicale

La glaire cervicale lors du cycle ovarien est serré en phase folliculaire càd en période pré-ovulatoire( où la concentration en oestrogène est élevé ) et fillante en phase lutale càd post ovulatoire( où la concentration en progestérone est élevé).  [...] C'est essentiellement dans la phase préovulatoire que la glaire cervicale est aqueuse et fluide, sous l'influence de l'oestrogène. donc au cours de la phase folliculaire jusqu'à l'ovulation, la glaire cervicale est permissive envers les spermatozoïdes et fournit un environnement aqueux et riche en électrolytes, vitamines, acides aminés, osides etc.   [...]

Dénaturation de l'ADN

Ben mis a part le fait que le code n'existe plus du fait de l'inexistence de l'une des proprietes de l'ADN (double helice), oui, c'est tout. Ca veut aussi dire que dans des milieux dont la temperature est trop eleve l'Adn ne peut exister. C'est tout.  [...] ils se font dans le sens contraire que l'enroulement de l'hélice d'ADN. Mais, lorsque l'on augmente la température, les super tours devienne positifs. c'est ce qui se passe pour les bactérie qui vivent dans des températures élevée.  [...]

[Physiologie] Potentiel osmotique

Pour qu'il y est entrée d'eau dans une plante, faut-il que celle-ci ait un potentiel osmotique plus élevé que le sol Si oui...Donc, dans un milieu sec, la plante va chercher à augmenter sa concentration en soluté pour attirer l'eau, ce qui va l'amener à avoir un potentiel osmotique élevé.  [...] dans un milieu sec, la plante va chercher à augmenter sa concentration en soluté pour attirer l'eau, ce qui va l'amener à avoir un potentiel osmotique bas. Contrairement, au milieu aquatique où elle va chercher à baisser sa concentration en soluté pour empêcher l'entrée d'eau et ainsi avoir un potentiel osmotique relativement élevé.  [...]