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[Biologie Moléculaire] stockage de sang pour prélèvement d'ADN

[Biologie Moléculaire] stockage de sang pour prélèvement d'ADN.  [...] voila j'ai des échantillons de sang, après 1 mois,je vais extraire par la suite de l'ADN, je pense qu'il faut les mettre a -20°. mais par en ce moment ils sont dans réfrigérateur(4° environ ) pour 3 jours, es ce que ça va altérer mon échantillon va être altéré, plus spécifiquement es ce que mon ADN va être altéré.  [...]

[Biologie Moléculaire] Meilleure technique d'extraction ?

Tu travailles sur du sang total Ou tu as des échantillons déjà pré-traités Comment fais-tu tes amplifications de l'ADN génomique Et quel ADN génomique t'intéresse. celui du patient ou celui des pathogènes.  [...] En fait je travaille sur sang total, à partir de prélèvement de patients en tubes héparine-lithium (on cherche à caractériser des gènes impliqués dans le retard psycho-moteur). A partir de ces échantillons, on utilise la technique de CGH-Array.  [...]

[Génétique] Amorce universelle M13 ?

Excusez-moi pour cette question naïve, mais je ne trouve pas d'info me permettant de comprendre sur internet. Je travaille dans un labo de biologie moléculaire qui fait essentiellement de séquençage et qui utilise des amorces M13. Je n'ai jamais vu cela en cours, est-ce que quelqu'un pourrait m'expliquer.   [...] Je suis désolé mais je n'ai pas très bien compris. En fait, au laboratoire de biologie moléculaire où je travaille actuellement, on fait du séquençage de gènes d'intérêt clinique (hémochromatose, tumeurs endocrines, cytochromes...) donc dans un premier temps, après extraction de l'ADN sur des échantillons de sang, les PCR sont faites.  [...]

De l'alcool dans l'ADN ?

Il a été fait des tests d'alcoolémie chez le chauffeur de la fameuse princesse qui se sont révélés positifs. Sur ce la famille de ce monsieur assure que leur proche était sobre et qu'il y a du y avoir confusion dans les echantillons de sang analysés pour déterminer son état d'ébriété.  [...] Pour mettre fin aux doutes, les echantillons de sang ont été repris, l'ADN comparé à celui des parents. C'était bien l'echantillon du chauffeur.  [...]

qPCR résultats hors gamme standard!!!

Pour les macrophages je peux savoir à peu près le nb de cellules que j'extrais mais c'est beaucoup plus dur pour le sang (globules rouges plus globules blancs). je traite mes extraits d'ARN avec de la DNAse alors j'espère qu'il n'y a pas d'ADN génomique dans mes échantillons.  [...] Des hybridation aspécifiques de tes amorces ou de ta sonde Cela dépend de ton échantillon aussi (pur ou échantillons biologique).  [...]

Conservation d'échantillons biologiques à t° ambiante

Au pire transporte tes échantillons dans un sachet étanche recouvert de glace, ce sera toujours mieux que la température ambiante. Comme l'a dit Gorben si c'estpour en extraire de l'ADN ca ne devrait pas poser de soucis, ca ne serait pas le même problème si tu voulais en extraire de l'ARN.  [...] L'ideal serait de t'assurer que l'ADN de tes échantillons soit extrait avant leur envoi, il est courant d'envoyer de l'ADN non réfrigéré pour séquencage et celui-ci résiste très bien pendant le transport.  [...]

Qu'est-ce que le postulat de Koch?

la PCR permet l'amplification d'une partie de l'ADN de maniere extremement importante et rapide (une sorte de photocpieuse), cela offre le gros avantage d'obtenir des quantités d'ADN travaillable a partir d'echantillons tres peu concentres.  [...] Comme l'a très bien expliqué Yoyo, cette technique permet une réplication de l'ADN et éventuellement une utilisation des échantillons ainsi obtenus.  [...]

Différences d'ADN entre les ètres vivant ?

Imaginons que tu me demandes de te fournir un échantillon de mon ADN pour faire une électrophorèse et que je te passe un échantillon contenant de l'ADN de salade, quelque chose te mettrait la puce à l'oreille ou non.  [...] Imaginons que quelqu'un me demande de lui passer 2 échantillons contenant mon ADN et que par mégarde je lui passe 2 échantillons d'ADN de salade.  [...]

[Biologie Moléculaire] mélange équimolaire des ADNs

J'ai 10 échantillons que je dois mélanger pour obtenir un mélange équimolaire de 2µg total, ça veut dire que je dois prendre 200 ng d'ADN de chaque échantillon. Ça veut dire que si par exemple mon échantillon d'ADN est concentré à 40ng/µl, je dois prendre 5µl pour un mélange.  [...] Pourtant ce n'est pas trop claire pour moi tout ça... J'ai oublié de dire que tout mes échantillons sont de même type, parce que ce sont des amplifias d'un même fragment du génome, ils ont donc tous la même taille et la même masse moléculaire. Est ce que dans ce cas là je peux faire comme j'ai écris dans mon premier message Ou je dois quand même calculer la quantité des moles de chaque échantillon à ajouter.  [...]

[Biologie Moléculaire] pb migration ADNg sur gel

2/ soit tu traites tes echantillons a la RNase pour 30 min, puis tu les passes soit sur une colonne du purif d'ADNg soit tu fais un phenol/chlo.  [...] La dans tes echantillons tu as doses ton ARN+ADN. Comme tu ne prend aucune precaution particuliere pour isoler l'ADN, ton ARN est +/- degrade.  [...]