• Forum - ADN, Bande, Marqueur

[Biologie Moléculaire] pb dosage ARNtotal spectro

Oui je retrouve de l'ARN...mais je vois peu la bande qui correspond à l'ARN 28S. Je vois bien la bande qui correspond au 18S + smear = ARNm. (il faut dire aussi que je n'ai pas de marqueur de migration d'ARN, du coup je mets comme marqueur du marqueur 1kb ADN double brin alors les tailles les distances de migration de correspondent pas entre mes ARN et le marqueur).  [...] La dilution que tu utilises est trop forte. Pour ta migration avec l'ARN, laisse tomber le marqueur de taille car les tailles sont differentes entre ADN et ARN. Perso, dans ce cas la, je n'en mets pas de marqueurs de taille.  [...]

[Biologie Moléculaire] Déterminer la masse d'ADN dans une bande après électrophorèse

Ensuite il y a une extrapolation à faire pour déterminer combien il y a d'ADN dans la bande de marqueur à partir de la quantité de marqueur déposée dans le puits.  [...] La question en elle-même est donc. comment faire pour déterminer la quantité d'ADn présente dans chaque bande du marqueur PM.  [...]

[Biologie Moléculaire] Electrophorese gel d'agarose

C'est pourquoi dans un des puits on verse une solution de marqueur de taille. C'est un cocktail de plusieurs ADN dont on connait la taille.  [...] Après migration tu observe une ou plusieurs bandes, tu compare la distance puits/bande à celle de ton ADN à celui du marqueur et tu peu déterminer sa taille.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de PCR

On a fait amplifier de l'ADN de certains de nos échantillons et on faisant migrer les produits sur gel, il s'est avéré que y a eu contamination (révélation d'une bande sur gel correspondant au contrôle négatif).  [...] Aucune bande qui pourrait montrer une certaine amplificationd'un fragment d'ADN. par contre tout en bas du gel et au niveau de tous les tubes y a une bande de la même taille et même intensité (paraît comme s'il s'agissait de fragments d'ADN dégénérés...) et qui correspond à la plus petite bande du marqueur et qui est située aussi tt en bas.  [...]

expression, répression d'un gène

A l'inverse dans par exemple la maladie de Marfan (dominante), un seul allèle muté suffit a l'installation de la maladie, parce que dans ce cas, la forme mutée de la protéine fibrilline interagit avec la forme sauvage qui ne peut meme plus assurer sa fonction elle même.   [...] Ensuite, l'ADN est déposé sur gel de polyacrylamide et à l'aide d'un marqueur de taille on peut déterminer le nombre de répétitions. Si la personne est homozygote pour ce microsatellite, il y aura qu'une bande, si elle est hétérozygote il y aura 2 bandes.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction ARN

les 18S et les 25S apparaissent mais avec une faible intensité, et j'ai une bandes en bas en sous du marqueur qui parait très intense est ce qu'il s'agit de contaminations ou d'ADN j'ai essayer de faire un traitement DNase la bande disparaît mais les 18 et 25S sont presque invisible,  [...] 6. Transférer (500µl) de la phase aqueuse supérieure dans un nouveau tube et ajouter 500µl d'isopropanol. Mélanger à la main doucement pendant 5 minutes.   [...]

[Biologie Moléculaire] Problème sur un exercice de génotypage

-Vous faites une PCR avec le premier marqueur puis les produits d'amplification sont séparés par électrophorèse et 5 individus ne présentent aucune bande. Pourquoi.  [...] - Vous avez eu des résultats satisfaisants pour 3 marqueurs sur l'ensemble des individus et pour le quatrième marqueur vous n'observez aucune bande sur 30 individus. Pourquoi.  [...]

[Biochimie] Concentration d'un produit PCR

ca depend de l'intensité de la bande, en général tu peu t'aider du marqueur de poids moléculaire. ca te donnera une idée de ta concentration.  [...] Oui on peut doser à partir d'un gel d'électrophorèse, en faisant des comparaisons de fluorescence (en gros on sélectionne une bande témoin ou on lui dit il y a tant et il peut estimer la quantité d'ADN dans notre bande). Après c'est un jeu. il faut bien sélectionner sa bande, avoir un gel propre, etc... Et la précision n'est pas super.  [...]

[Biologie Moléculaire] le gel idéal??

Le plus bas que j'ai fait c'est 0.4% d'agarose et ça pouvait encore allé, d'où ma remarque sur le 0.2%...C'est vrai que ça fait peu. Déjà si tu fais un 0.6% ce sera mieux en effet. Mais ton but n'est apparemment pas de séparer des fragments d'ADN génomique, c'est plutôt pour voir si ta purif a bien marché, je me trompe Dans ce cas l'important est que ton ADN génomique rentre dans le gel pour vérifier la netteté de la bande, afin de voir s'il n'y a pas de dégradation qui causerait un smear en-dessous.  [...] Ensuite, pour visualiser des ARN, il faut en mettre une quantité relativement importante et troisièmement, si tu voyais des ARN en bas, tu en verais aussi en haut qui représenteraient les ARN 18s par exemple. Or ici on ne voit qu'une faible bande en haut et un petit paté en bas qui selon moi n'est rien autre que des ADN un peu degradé, d'ailleurs, on peut voir un léger smear sur ton gel.  [...]

[Biochimie] La Replication de l'ADN durant l'Interphase

Pas une ou deux bandes étroites et bien définies, mais une plage très large s'étalant entre les deux valeurs extrêmes 1,710 et 1,724. Essaie de réfléchir, c'est le but de l'exercice.  [...] - Après le temps de deux cycles cellulaires, la bande d'ADN c'est divisé en deux. une bande de densitée égale à 1.710, et une autre bande de densitée égale à 1.717. on observe donc la présence d'ADN hybride et léger, l'ADN lourd à disparu.  [...]