• Forum - ADN, Bande, ARN

[Biologie Moléculaire] Problème de PCR

Lors que nous avons fait sa sur nos nouveaux patients, nous n'avions rien en PCR1 et 2, juste une bande en dessous de 100pb (surement les amorces...) au lieu de la bande attendue à 1700pb.  [...] Nous sommes donc repartis des extractions d'ARN, des ADNc et des PCR1 de cet été et nous avons obtenus des smear (une énorme bande très difuse) qui se trouve de 0 à 700pb en PCR1 et de 1000 à 3000pb en PCR2 avec une tendance a être un peu plus fort au niveau de 1700pb (bande attendue).  [...]

[Biochimie] etude de proteine de liaison à l'ADN

j'ai fait un TP ou on a purifié un domaine de liaison a l'ADN et je suis sur que pour l'examen qu'en passe dans 2 jours ils vont nous demandé les techniques permettant d'étudier cette liaison.  [...] En gros, ta sonde libre va migrer en bas du gel, et en présence d'une interaction avec une protéine, le complexe ADN-protéine sera ralenti dans le gel puisque plus gros. il apparaitra une bande radioactive dite retardée.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de gel d'agarose

Le 1er gel est tout à fait normal, tes ladders sont propres, pour les bandes incurvées c'est pas super flagrant et surement lié à la quantité d'ADN.  [...] Il m'est arrivé d'avoir des bandes moches comme ça lorsque je m'étais planté de bleu de dépôt, j'avais utilisé du bleu de dépot de protéines (avec bétamercapto) pour migrer de l'ADN.  [...]

une seul bande d'ARN visible voir deux...

Avec difficultés j'ai pu voir une deusieme bande mais très faible. Cela pourrait il venir de la concentration trop élevé de mon échantillon de départ (avant extraction de l'ARN).  [...] sur 10 dépots je vois pour le dernier 1 bande bien vsible tout en haut puis une tres faible juste en dessous puis un smire sur plusieurs cm après. Non rien tout en bas.  [...]

[Génétique] Analyse plasmides recombinants/non recombinants

En fait, j'ai une bande à 3000 pb, et une bande à 6000… sachant que mon plasmide fais 3000 pb est ce que ça veut dire que mon insert fait 3000 pb et qu'il y a des plasmides non recombinants (bande à 3000 pb) ou y a t-il encore une histoire de relâchement Je me suis aussi demandé s'il était possible qu'il y ait des inserts en large excès et que les plasmides soient tous recombinants.  [...] . lors de la lyse de mes bactéries, un grand nombre étaient bleues dans mon tube A contrairement à mon tube B ou elles étaient toutes visiblement blanches… De plus, la bande à 3000 est beaucoup plus prononcée que la bande à 6000, à peine visible….  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème révélation WB

D'après ce que tu dis, je ne suis pas plus étonné de la disparition de cette bande lors de la deuxième révélation puisque c'est la moins intense de toutes. L'inverse aurait été surprenant. Là c'est juste que pour voir la bande en question, il faut exposer plus.  [...] Evidement je ne trouve cela pas surprenant non plus, je cherche juste une explication au fait qu'une bande ait disparu alors que les deux autres sont totalement intactes.  [...]

[Biochimie] Test de grossesse

l'urine migre sur la bandelette contenant anticorps HCG* qui détecte la sous unité bêta de l'hormone HCG( seulement si la femme est enceinte) et des anticorps placé plus loin qui détecte la sous unité alpha d'HCG(pour contrôler si le test a fonctionner. Cette partie de la bandelette ce colore même si la femme n'est pas enceinte.).  [...] Probablement que la bande contrôle détecte une molécule qui est toujours présente dans les urines de la femme, qu'elle soit enceinte ou pas. Cela permet de vérifier si les conditions pour que ce type de test marche sont réunies. Dans le cas où le contrôle positif ne s'allume pas, on peut considérer le résultat du test non valide.  [...]

[Biologie Moléculaire] Causes d'échecs de la production de protéines recombinantes

Logiquement, la grosse bande n'est pas encore présente sur gel pour cet échantillon. Donc tu peux voir ainsi, en comparant les deux puits, à quelle taille apparaît ta protéine (à supposer que tu ne la connaissait pas, ce qui semblait être ta question, même si c'est bizarre ).  [...] ) car au bout d'un certain temps on n'observe plus d'augmentation de la production. Et au bout d'un long moment on observe même une diminution de l'intensité de la bande car la protéine est dégradée. Il faut donc trouver l'équilibre pour avoir une bonne production sans qu'il y ait protéolyse.  [...]

[Biologie Moléculaire] electrophorèse en gel d'agarose

L'ADN non digéré est super-enroulé, il donne donc des profils de migrations comme celui-ci. Avec des bandes correspondantes aux formes relachées, superenroulées etc.  [...] apropos de ce sujet,dans un profil d'electrophorese comment on arrive a distinguer entre une bande qui correspond a un plasmide,ou a un chromosome,,  [...]

[Génétique] problème d'extraction d'ADN

Du génomique sur gel ça ne fait pas une seule bande mais un smear de hautes tailles. Après je n'ai pas vu dans ses dires que le profil de migration changeait après quelques jours. J'ai trouvé assez évasive la description de la dégradation.  [...] Techniquement non pour du génomique si il n'est pas degradé tu obtiens une seule bande (plus ou moins epaisse par rapport à une bande normale) car les chromosomes font plus ou moins la meme taille (apres ca depend des organismes, je ne parle pas du chromosome Y humain comparé aux autres) et et les quelques differences de taille ne se voient pas à de hautes tailles à moins de faire migrer longtemps.  [...]