• Forum - ADN, Bactérie, Hybridation

[Microbiologie] Hybridation par Southern-Blot

svp quelqu'un pourra m'expliquer les résultats d'une hybridation avec du l'ADN 16s et de gene de résistance (afin de déterminer si le gène de resistance est chromosomique ou nn ). pour bien expliquer.j'ai fais le transfert des fragments d'ADN par Southern Blot (ADN digeré par une enzyme )(2 copies d'echantillons )et j'ai fais du PCR pour un gene de resistance de cette bacterie (c'est du PCR multiplexe c'est ça) et une PCR 16s(de quoide l'ADN de cette bacterie),puis ils m'ont dis de faire une hybridation.  [...] la question. si le gene est chromosomique par expl ça doit etre quoi la resultat.   [...]

[Biochimie] sondes nucléiques

Je ne comprends pas quelques petits points à propos de ces sondes. On étudie E. coli, et pour identifier cette bactérie, on peut utiliser les sondes nucléotidiques (la pcr). Ma prof. dit qu'on peut aussi quantifier / dénombrer. Quelqu'un sait comment on fait.  [...] Si on utilise des marqueurs fluorescents, on peut donc passer au spectro pour quantifier quelque chose, mais comment fait on sachant que l'on amplifie l'adn de la bactérie avant l'hybridation.  [...]

[Microbiologie] Kit hybridation ?????

SVP est ce que quelqu'un peut m'expliqué on veut dire quoi par un Kit lors de préparation d une hybridation( ADN-ADN pour vérifier l existence d un gene de résistance d une bacterie ).ils m'ont dit aussi que ce Kit doit etre compatible avec les membranes,quel membranes.  [...]

detection de germes pathogènes

Sinon, les puces à ADN ont un avenir certain en bactério de routine (que ce soit médical ou agroalimentaire). Il suffira simplement d'obtenir des puces sur lesquelles sont fixées des sondes spécifiques du génome de telle ou telle bactérie puis d'effectuer une hybridation à partir d'un extrait d'ADN du prélèvement à analyser.  [...] On peut quand même supposer que dans un avenir plus ou moins proche elle pourra prendre le pas, dans certains cas, sur la culture bactérienne limitée par le temps (18h + 24h d'identification en général)...ou bien une technique basée sur le même principe.  [...]

[Microbiologie] la microbiologie alimentaire

La brucellose est une maladie infectieuse grave liée à la consommation d'aliments bien particuliers, le fromage de chèvre étant souvent mis en cause. Elle ne poserait aucun problème si le lait destiné à leur fabrication était pasteurisé. La recherche de cette bactérie se fera par hybridation ADN-ADN, alors que la recherche des anticorps anti-Brucella dans les produits laitiers se fait par le ring test.  [...] La recherche du germe par les méthodes traditionnelles est fastidieuse et longue. La recherche par hybridation ADN-ADN, les méthodes immuno-enzymatiques réalisées après enrichissement sont des techniques de recherche actuelles et dont la modernisation est continue.  [...]

[Biologie Moléculaire] hybridation moléculaire

bonjour, svp j'ai pas pu faire une interprétation des résultats d'une hybridation moléculaire, est ce que quelqu'un pourra m'aidé.merci.  [...] ou chromosome) dans le génome des souches d'une bacterie enterique l'ADN des souches a été digéré avec l'enzyme I-CeuI, et une électrophorèse en champ pulsé a été lieu(figure A) ensuite une hybridation avec une sonde marquée spécifique du gène bal1(figure B ) et une sonde du gène de l'ARN ribosomal 16S (figure C).  [...]

[Génétique] hybridation adn/adn : technique de southern blot

Ensuite, j'ai effectué une électrophorèse en gel d'agarose à 1%. la migration à duré 1heure environ, à 120volts. Le problème qui se pose est qu'à l'issue de la migration, les fragments des différents puits ont très peu migrés, puisqu'à peine 3 ou 4 bandes sont visibles en haut du gel.   [...] Par contre je n'ai pas bien compris le rôle du tampon 10x. S'agit-il bien d'un tampon permettant l'activation de l'enzyme en question Dans ce cas, une quantité insuffisante de ce tampon expliquerait - il une digestion incomplète de l'enzyme, d'où le fait que j'obtienne des fragments trop gros restant coincés en haut du gel comme tu l'as dit.   [...]

[Génétique] CGH hybridation génomique comparative

Après l'hybridation compétitive sur chromosomes normaux, on fait une analyse des taux d'hybridation de chacun des deux ADN sondes, au niveau de chaque chromosome.  [...] En fait, tu prends un ADN de référence (sujet sain) et un autre à tester (sujet malade). Tu associes un fluorochrome de couleur différente à chacun des deux ADN et puis tu hybrides sur des chromosomes métaphasiques.  [...]

[Biologie Moléculaire] Adn...

Si deux brins presque complémentaires (juste une petite fraction de leur séquence ne remplit pas cette condition de complémentarité), le réappariement se fera également mais dans des conditions un peu moins strictes. L'appariemment entre deux brins qui ne proviennent pas de la même double hélice est l'hybridation entre ADN différents.  [...] Les hybridations ADN-ADN étaient une technique qui faisaient fureur dans les années 70-80 pour distinguer les espèces bactériennes. On prenait l'ADN de 2 bactéries et on essayait d'apparier les brins ensemble pour voir si elles étaient de la même espèce ou non, et si l'hybridation était imparfaite on étudiat les différences selon leur % d'hybridation.  [...]

[Biologie Moléculaire] hybridation ADN /ARN sens / antisens

Ma question concerne l'hybridation de séquence d'ADN et d'ARN mises en solution.  [...] Est-il possible qu'elle s'hybride malgré leur orientation identique.   [...]