• Forum - ADN, Bac, Intérêt, Cellule

[Génétique] Production de souris transgéniques

Les FRT, c'est pas pour l'injection en elle même. C'est juste que si tu le souhaite, tu peux placer autour de ton gène d'intérêt des sites FRT. Ca permet, si tu fournis une source de flipase, d'induire une recombinaison site-spécifique et donc d'exciser le gène placé entre les séquences FRT.  [...] Comme je l'ai dit, on utilise la recombinaison homologue pour de petits fragments d'ADN dans le cas de transfection de cellules ES, afin de cibler une intégration précise dans le génome.  [...]

The murine bacterial artificial chromosome 189 N3 (mBACtgDyrk1A)

svp c'est hyper hurgent. quelqu'un pourrai-il m'expliquer cette phrase et aussi la technique dont elle parle The murine bacterial artificial chromosome 189 N3 (mBACtgDyrk1A) strain has been constructed by electroporating HM-1 embryonic stem (ES) cells with the retrofitted BAC-189 N3.  [...] grosso modo de ce que j'ai compris, ils ont transfecté une cellule embryonnaire de souris avec le chromosome BAC-189 N3 par électroporation (tu fais des trous dans ta cellule pour faire rentrer de l'ADN) pour générer la lignée... mBACtgDyrk1A.  [...]

les vecteurs YAC et BAC

Les YAC (Yeast Artificial Chromosomes) sont des vecteurs pour cellules eucaryotes. Leur mise au point est due aux travaux de BURKE et al. (1987). Ils permettent de cloner de très grands fragments d'ADN (100 à 2000 kb) dans les cellules de la levure Saccharomyces cerevisiae.  [...] Les BAC (Chromosome Artificiel de Bactérie) sont des vecteurs servant à cloner de grands fragments d'ADN (100 à 300 kb) dans les cellules d'E.coli.  [...]

[Divers] Confusion sur les notions "basiques"

En même temps on va pas nous interroger au bac sur la structure de la cellule du moins aussi basiquement mais je considère que c'est très important (utile pour l'intro dans les copies), donc absolument combler cette lacune.  [...] hmm ouais c'est vrais ya pas mal de ressources sur le net je vais chercher un peu cependant je voudrais poser cette fois ci une question un peu plus précise. la séquence primaire et secondaire c'est quoi la différence et quels sont leurs fonctions dans la structure celluleleurs rôles et sur quoi repose t-elle.  [...]

Isoler une région d'un génome à partir d'un BAC

Mon problème. Je veux isoler une région de quelques Kb, englobant un gène d'intéret, à partir d'un BAC dont la séquence est connue.  [...] Cela va deja te permettre d'identifier les colonies possédant un BAC avec ta region d'interet. Ensuite seul le sequençage te permettra de t'assurer que tu as l'integralite du gene recherché, car comme il proviens de la souris tu travailles tres probablement avec une banque de BAC contenant du cDNA et tu n'es jamais a l'abri de problemes techniques lors de la reverse transcription (ou que tu ARNm soit epissé alternativement, ou possede plusieurs initiation/termination transcriptionelle.).  [...]

[bio mol] Séquencage. RFLP

2/ je ne saisie pas trop l'interet des sondes multilocus dans la méthode RFLP. Une sonde monolocus est utile pour différencier 2 individus par exemple, mais quel est l'interet d'explorer une soixantaine de locus chez un meme individu sans pouvoir différencier les 2 allèles.  [...] Quand le séquencage est en shotgun (séquencage de génomes), une banque d'ADN (ADNc) issue de la digestion statistique de ce fragment est clonée dans un plasmide, un BAC ou un YAC. Des molécules de plasmides (BAC,...) intègrent.  [...]

[Génétique] marche sur le chromosome

J'aurais aimé savoir si quelqu'un pourrait m'expliquer en quoi consiste et comment on effectue la marche sur le chromosome lors du clonage positionnel. J'ai trouvé des choses sur le net mais je ne comprends toujours pas comment on procède.   [...] Dites moi si j'ai bien compris. on cherche à mettre bout à bout des fragments d'adn ( BAC, YAC..) jusqu'au moment de trouver un fragment qui contiennent les 2 marqueurs chromosomiques et le gène muté. On peut donc de cette manière restreindre la partie contenant le gene à un BAC ou YAC ce qui facilitera la prochaine étape du clonage positionel.  [...]

[Biologie Moléculaire] Quel vecteur pour quel type d'insert?

Pour cloner de l'ADN quelle type de vecteur je dois utiliser un cosmide, BAC ou YAC.  [...] Je ne comprends pas pourquoi les bactériophages ne sont pas des vecteurs navettes (çà aurait un rapport avec la capside mais j'en sais pas plus).   [...]

construction d'un BAC

je cherche à comprendre comment on fait pour avoir des animaux transgéniques (souris) par la méthode des BAC, et surtout comment on fait pour construire le BAC d'intérêt.  [...] Par exemple (tout à fait au hasard.) un BAC porteur de gène de l'EGFP tant qu'à faire, précédé d'un promoteur (quelconque).  [...]

Génétique et croisement

Bonsoir, je sais que ce sujet a été beaucoup abordé (peut être trop d'ailleurs), mais j'ai besoin de vous... Etant en révision pour le bac, je patauge complètement sur la génétique, pas sur les processus comme les brassages, ou la méiose en elle même mais surtout dans la pratique dans les exercices.  [...] Par exemple lorsqu'on recueille les pourcentages de génotypes quand on obtient. 50%-50% ou 25%/25%/25%/25% ou encore 45%/45%/5%/5%... De plus l'intérêt du test cross m'échappe.. Le début des exercices aussi, quand on doit au préalable dessiner les cellules subissant cette méiose, par exemple quand on nous annonce qu'on un individu homozygotes aux caractères étudiés ou possédant des gènes liés ou indépendants, j'ai vraiment un peu de mal, j'avais eu un exercice de ce type au bac blanc et je n'ai eu que 1.75/6.  [...]