• Forum - ADN, ARN, Fonction, Cycles

[Biochimie] Technique de PCR en temps réel

Pour le graphique de gauche pas de problème pour le comprendre. la PCR crée des copies donc l'ADN et l'ARN augmentent en fonction des cycles.  [...] Dans le cas idéal, si on représente le cycle number en fonction du log de la quantité initiale de matrice, on obtient une droite comme sur le panneau de droite, dont la pente est corrélée a l'efficacité de PCR.  [...]

mix pcr

Si tu fais une RT-PCR, tu ne commences pas avec de l'ADN, mais de l'ARN. Plus sensible, plus fragile, plus délicat... Les cycles d'amplification à vide ont du le dégrader en (grande) partie.  [...] oui c'est vrai, j'ai essayé d'ajouter un mix à mon extrait de pcr et de relancer, il semble qu'une amplification a eu lieu cette fois ci, j'ai une concentration de 2600ng/µl et un rapport 260/280 de 1.6, cependant j'ai un doute est ce que c'est mon adn qui a été amplifier ou bien c le produit de mes propres amorces.  [...]

[Génétique] code génétique universel

Les bases présentes dans l'ADN sont Adénine, Cytosine, Guanine et Thymine. Dans l'ARN, la Thymine est remplacée par l'Uracile. Ces structures ne désignent que les bases azotées, ce sont des cycles puriques (A et G) ou pyrimidiques (les trois autres).  [...] Ensuite, les nucléosides. c'est l'association d'une base + un sucre. Dans l'ADN, c'est le désoxyribose (comme la lettre D de l'ADN le précise), dans l'ARN, c'est du ribose. Les 5 nucléosides qui nous intéressent sont l'Adénosine, la Guanosine, la Cytidine, la Thymidine, et l'Uridine.  [...]

[Biologie Moléculaire] Pcr

On se sert de molécules fluorescentes qui, avec des particularités selon la méthode utilisée, va permettre de suivre la synthèse des amplicons au cours de la réaction, en ne ciblant que les spécifiques ou non. On pourra ainsi obtenir des courbes représentant l'augmentation de la fluorescence (et donc incidemment de l'ADN) en fonction du nombre de cycles effectué.  [...] Cette technique se caractérise par ce qu'on appelle le Ct (ou Cq selon les appareils) il s'agit en fait du cycle auquel un puits dépasse un seuil théorique,  [...]

[Biologie Moléculaire] CT variable

j'ai eu du signal pour presque toutes les dilutions, les résultats de validation d'amorce que j'ai sont loin d'être satisfaisant du fait que les ct sortent de manière désordonné et très variable, c'est a dire vu que j'ai un facteur de dilution de 2 je devrais avoir deux ct de différence entre chaque dilution, et plus la concentration en ADN initiale est élevé plus le ct sort plus tôt.  [...] déja l'intensité de fluo varie en fonction de l'étape du cycle, mais si tu prend l'intensité de fluo uniquement à l étape ou les brins sont hybridé, alors tu n'est pas censé avoir de baisse puisque ca reviendrai a dire que tu as perdu de l'ADN si tu as moins d'intensité qu'au cycle precedent (comme on peut le voir pour les cycles 10, 13, 14, 15, 19 sur ton graphe.  [...]

[Génétique] PCR - Calcul du nombre de cycles

Je partirais du principe qu'un microgramme représente Da. Avec un amplicon de 2001 pb qui fait Da, on peut calculer le nombre de cycles nécessaires pour arriver à 1 microgramme si on commençait avec un seul template. Après, il suffit de trouver encore combien de templates on a dans notre échantillon de départ avec le fait qu'on a 10 ng d'ADN de 1 milliard de pb.  [...] Ensuite, vu que tu sais comment se comporte la quantité d'ADN a chaque cycle d'amplification, il suffit de calculer le nombre de cycles pour arriver a 1µg.  [...]

dangerosité des ultraviolets

On sait que les UV B altèrent chimiquement les bases, en particulier en provoquant l'association, par liaison chimique forte, de deux thymines proches, ce qui donne un dimère de cyclobutane. Les gènes portés par l'ADN s'en trouvent modifiés. Cette réaction chimique explique le fort pouvoir mutagène des UV B.  [...] Pourquoi l'ADN Et bien parce que les molécules qui composent l'ADN, les bases azotées, possèdent des caractéristiques qui permettent l'absorption des UV. Une de ces caractéristique est que ce sont des cycles. Les cycles absorbent bien les UV car ceux-ci (les rayons) véhiculent des énergies capable de produire des transferts d'électrons.  [...]

[Biochimie] La Replication de l'ADN durant l'Interphase

On remarque que la bande d'un cycle cellulaire se divise en deux pour former un temps en deux cycles. Donc ce serait l'hypothèse semi-conservatif avec les deux brins de l'ADN qui se séparents et servent de modèles pour former de nouveaux brins complémentaires.  [...] Après le temps d'un cycle cellulaire, on peut exclure le modèle conservatif qui garde l'hélice intitiale intacte et qui crée une deuxième copie de l'hélice initiale. il est uniquement composé d'ADN lourd et léger, il ne forme pas d'ADN hybride.  [...]

[Génétique] les différentes étapes pour une PCR

J'ai une autre petite question, j'ai compris comment fonctionnait une PCR mais pendant notre TP on a fait une étape à 95°C pendant 10min avant de commencer les cycles de la PCR. Normalement à 95°C c'est pour dénaturer les 2 brins d'ADN mais pendant le cycle 15secondes suffisent alors pourquoi on fait 10min avant.  [...] Avant de commencer ta PCR, ton ADN est souvent en pelote. cette étape de chauffage va servir à bien dénaturer tous tes doubles brins. Elle dure 10 minutes pour etre sûr que tous tes brins vont se séparer.L'amplification va ensuite pouvoir commencer sans problème.  [...]

virologie

Si le brin est -. il doit d'abord etre reverse transcrit en ADN grace a une reverse transcriptase possédée par le virus, puis le brin d'adn sera transcrit en ARN puis traduit par la machinerie de l'hote.  [...] Le passage d'ARN à ADN ne se fait que chez les Rétrovirus, chez les autres virus à ARN- il y a transcription du brin - en brin + (par une RNA polymérase), ce dernier sera alors pris en charge par les ribosomes.  [...]