• Forum - Activité, Enzymes, échantillon

[Biochimie] dosage enzyme pour quoi utiliser le bain-marie ?

Je pense que pour la préparation du tissu dans le tampon, on dit qu'il faut travailler dans la glace 4C°,c'est pour inactiver l'enzyme(par le froid) et éviter l'augmentation de la température du tissu lors du broyage et de ce fait éviter la dénaturation de l'enzyme, car une enzyme soumise a basse température est inactivé mais elle n'est pas dénaturée (et qui est donc de ce fait détruite comme dans le cas d'une haute température).  [...] Soit on veut empêcher que l'enzyme soit active durant la phase de préparation (car ainsi il n'y a aucun produit de formé, toute l'activité que tu verras par augmentation de l'absorbance sera du à des réaction se produisant à ce moment là), soit il y a d'autres enzymes ou inhibiteurs de ton enzyme dans l'échantillon qui pourrait dégrader ton enzyme d'intérêt.  [...]

Température minimale pour la prolifération de la vie ?

Pour une simple activité métabolique, le record serait, à ma connaissance, de -39°C dans un échantillon de sol de la toundra d'Alaska.  [...] Très peu probable que la valeur de -24°C que tu citais au début concerne la température interne d'un organisme unicellulaire. Les techniques généralement utilisées sont soit des mesures in situ (autrement dit, en mettant un thermomètre au plus près de la où on trouve les microorganismes dans le milieu naturel, soit des mesures contrôlées en laboratoire, en ramenant un échantillon de sol, de vase, de cheminée hydrothermale et en regardant à quelle température minimale (ou maximale) les cellules qui s'y trouvent commencent à mourir.  [...]

[Biologie Moléculaire] PCR quantitative

2. D'où 2ème problème. il peut arriver que l'efficacité de la PCR soit différente entre la PCR sur la gamme standard et la PCR sur l'échantillon. Notamment si les conditions/méthodes d'extraction d'ADN sont différentes, tu peux avoir des contaminants différents qui vont influer différement sur l'efficacité de PCR, et donc l'utilisation de la gamme standard sera un peu faussée.  [...] DONC. tout dépend de la précision requise, du type de matrice (ADNc, ADN génomique,...), de l'origine des échantillons (végétal, animal, bactérien) et de la qualité d'extraction des acides nucléiques.  [...]

[Biochimie] Spectrophotomètrie : Les différentes technologies...

la longueur d'onde d'émission). Cela permet de quantifier un échantillon capable d'émettre en fluorescence. EX. tu veux quantifier une protéine genre GFP. Tu programmes ton fluo pour qu'il excite a 488nm et tu mesures les photons émis en fluorescence par la GFP a 505nm, proportionnels à la quantité de GFP.  [...] colorimètre. permet de doser un échantillon en fonction de l'absorbance de celui ci pour une couleur de lumière donnée. Par exemple tu as un échantillon vert, tu peux le doser a partir d'une gamme étalon en mesuran son absorbance d'une lumière bleue (obtenue avec des filtres). Surtout utilisé en chimie.  [...]

technique de cryofracture et cryodécapage

Petite question technique en ce qui concerne les méthodes d'observation des menbranes (plasmique surtout). dans la technique du cryodécapage j'ai pas compris l'intéret de projetter de la platine sur l'échantillon.  [...] En fait, quand tu fais ta fracture dans ton échantillon congelé avec ton microtome, la fracture va suivre la ligne de moindre cohésion (donc la membrane), mais de chaque côté, il va rester le cytosol congelé et composé surtout d'eau.  [...]

[Biologie Cellulaire] Microscopie

L'excitation se fait sur toutes les couches, mais elle sera plus concentrée sur la couche voulue, car la lumière du laser passe à travers le même objectif que la lumière émise par l'échantillon (la lumière du laser est réfléchie par un miroir dichroïque, alors que la lumière émise passe à travers).  [...] Pour prendre des images, il faudra bouger l'échantillon (ou le système optique) sur de très petites distances (sous le micron). Ceci limite aussi la résolution, puisqu'il faut des systèmes très précis pour bouger rapidement et précisément le système optique par rapport à l'échantillon.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de gel d'agarose

Quand tu modifies ton adn avec des enzymes les tampons d'activité contiennent souvent des produits qui pourrissent la migration, c'est surement ça.  [...] Sels dans l'échantillon. J'ai une fois résolu le problème par hasard en oubliant de mettre le courant après avoir chargé mon gel avec des échantillons que je savais chargés en sel. Les échantillons étaient sagement restés dans les puits pendant 4 heures et, pendant ce temps là, le sel avait eu le temps de diffuser dans le tampon.  [...]

Goût pour la viande ou le tabac.

Pour en avoir le coeur net, sachant qu'en Biologie rien n'est jamais vrai à 100 %, et qu'un échantillon constitué d'une seule personne, c'est vraiment très, très peu, il faudra que je fasse l'expérience sur moi-même. cigarette électronique avec nicotine et cigarette électronique sans nicotine mais goût de fumée de tabac (qu'il faut encore trouver).  [...] Et pour finir, les addictions ne sont pas une science nouvelle, iln'y a pas non plus eu que un echantillon, cela à été étudié sous toutes les coutures si tu prend la peine de te renseigner,  [...]

[Biochimie] Test de grossesse

Quand tu mets ton echantillon tu fais migrer un Ac-anti hcg (qui migre avec l'urine ou le sérum). Tu as donc soit l'ac anti hcg seul ou le complexe ag-ac si l'hormone est présente. Dans une première fenetre tu détectes l'ac antihcg (libre ou lié) il se forme le -.  [...] Je rappelle que les Ac antihcg migrent en même temps que ton échantillon (ils sont présents dans le fond du puits où tu mets l'échantillon).  [...]

Qu'est ce qu'un type de l'espèce ?

Dans ma leçon, j'ai. la notion de type de l'espèce -. des espèces rattachés à un échantillon type. Le support matériel de l'espèce est un échantillon type. Ce notion de type s'applique ici aux plantes. Cependant, je trouve que cela n'est pas suffisant pour répondre à cette question.  [...] Du coup je vous demande de m'aider pour répondre à cette interrogation. Leurs utilités pour moi est de conservé échantillon type afin de pouvoir déterminer les espèces sur le terrain mais aussi de pouvoir suivre l'évolution de cette espèces. Du coup cela répond aussi au pourquoi et je ne sais pas où sont ils conservés.  [...]