• Forum - Activité, Enzyme, Substrat, Produit

[Biochimie] Marquage enzymatique

Je m'intéresse en ce moment aux techniques cytochimiques et histochimiques, et en particulier aux marquages enzymatiques. J'ai compris qu'on pouvait révéler l'activité d'une enzyme par son produit coloré, observable en microscopie photonique, ou opaque aux électrons, obsevable en microscopie électronique (avec introduction préalable de substrat).  [...] J'ai également lu qu'une deuxième possibilité était de révéler un substrat par son enzyme. seulement, je ne comprends pas en quoi cette deuxième technique diffère de la première...Ne révèle-t-on pas le substrat par le produit coloré qu'il forme avec l'enzyme.  [...]

[Divers] Détection enzymatique

En fait les enzymes catalysents les réactions non Donc pour détecter une activité enzymatique, il faut regarder à quelle vitesse le substrat se transforme en produit.  [...] Cela dit, en pratique, pour détecter l'activité de l'enzyme, il faut déjà avoir un marqueur. Et même pour être plus précis, il va falloir que t'aies un marqueur spécifique de ce que tu veux mesurer. Toi, potentiellement, ce qui t'intéresse, c'est de mesurer ou la quantité de substrat, ou la quantité de produit.  [...]

Second messagers

Pour ce qui est des phospho inositol, le DAG n'en fait pas partie car c'est du Di Acyl Glycérol.... L'IP3 se fixe sur un canal calcique du RE et permet l'augmentation du Ca2+ intracellulaire ce qui amène la PKC en position sous membranaire, le DAG produit parralèlement par la PKC permet ensuite l'activation de la PKC (en s'ouvrant l'enzyme permet au site pseudo-substrat inhibiteur du site catalytique de se détacher et on a une activité kinase.  [...] Bon je vais essayer de me connecter régulièrement aujourd'hui mais sans garentie car j'ai beaucoup de boulot (révélation de Western entre autre, sur l'activité Erk puisqu'on en parle... ).  [...]

catalyse enzymatique

En réalité, lors de la fixation enzymatique, le complexe ES est faiblement stable car justement cela permet d'avoir une libération du substrat (pour former le produit par exemple) plus facile et d'abaisser également l'énergie d'activation. Cette déstabilisation nécessaire peut se faire par désolvatation du substrat lors de sa fixation sur l'enzyme ou par déstabilisation électrostatique (exemple.  [...] Bonsoir, J'avais effectivement lu ceci néanmoins je ne suis pas sure de comprendre. Je n'ai pas mon cours sous la main mais on disait que l'enzyme aurait une meilleure affinité pour l'état de transition que pour le substrat, pourtant un état de transition ne peut pas etre isolable, je veux dire dans le temps il peut soit revenir en arrière soit former les produits donc comment avoir une affinité avec puisqu'il ne persiste pas De plus, le but d'une enzyme ce n'est pas d'avoir une affinité super forte avec le substrat si elle est moindre l'activité n'est pas bonne alors pourquoi il faudrait qu'elle soit minimisée Je ne sais pas si je suis claire ou si vous voyez où je veux en venir.  [...]

Quelle est cette unité ?

L'unité d'activité enzymatique (U) est définie en terme de quantité de substrat disparaissant par unité de temps ou de quantité de produit apparaissant par unité de temps.  [...] Bref, en gros, c'est la vitesse à laquelle travaille ton enzyme (restriction, polymérase, protéase...) car ce qui est compté est le substrat consommé ou le produit apparut.  [...]

[Biochimie] Inhibiteur non compétitif et inhibiteur allostérique

Un inhibiteur allostérique modifie t-il l'affinité de l'enzyme pour son substrat si oui est-ce une autre différence (l'inhibiteur non compétitif ne modifiant pas l'affinité de l'enzyme pour son substrat mais modifiant la Vmax).  [...] L'inhibiteur allosterique va quant-a se fixer sur une enzyme allosterique. L'effet est cependant different. l'enzyme reste active et continuera a liberer le produit, mais son affinité pour le substrat (et/ou son Vmax) va etre modifiée.  [...]

Inhibiteur compétitif

Tout comme la liaison du substrat à l'enzyme, la liaison de l'inhibiteur compétitif est réversible. Celui-ci, en se fixant à l'enzyme au niveau du site actif (site liant le substrat) réduit par conséquent son activité par compétition avec le substrat. Toutefois, l'enzyme peut atteindre sa vitesse maximale d'activité enzymatique si l'on augmente la concentration en substrat.  [...] Pour répondre à ta question, l'inhibiteur compétitif inhibe toujours l'activité enzymatique, bien qu'en présence de substrat celle-ci existe toujours (même si parfois très faible).  [...]

[Biochimie] Enzyme michaélienne

- Une enzyme qui ne reconnait QUE LE SUBSTRAT (...et pas le produit).  [...] Sauf erreur de ma part, (le cas échéant je m'en échéant je m'en excuse), une enzyme michaelienne est aussi capable de fixer d'autres molécules que son substrat, dans le cas par exemple des inhibitions compétitives et non compétitives. Vous avez l'exemple de la succinate déshydrogénase qui, est une enzyme michaelienne capable de fixer le malonate à la place du succinate sur son site actif.  [...]

[Divers] But biologique de la vie.

Sinon on peut parler du but d'une enzyme qui est de transformer un substrat en un produit donné, et on ne s'en sort plus. Je pense que la plupart des intervenants l'ont bien compris et ce sont correctement exprimés sur le sujet.  [...] Ah bon Pourtant c'est la même chose. l'enzyme n'a pas de volonté, elle ne fait qu'abaisser l'énergie d'activation d'une réaction chimique. En ce sens là elle augmente la probabilité d'occurrence d'une réaction chimique. Tu vois que je reste bien dans les termes probabilistes (une tendance vers quelque chose) et que je n'ai pas énoncé une seule fois le mot volonté.  [...]

petite question sur la dénaturation d'une protéine

La dénaturation est liée à la structure de la protéine, à la présence de fonctions ionisables ou non. A mon avis si on retire l'agent cahotropique et qu'il n'a pas modifié ces liaisons, certaines pourront reprendre leur état fonctionnel. En plus, est ce qu'il n'existe pas des protéines chaperonnes, pas systématiquement mais qui aident au bon repliement de la protéine Si quelqu'un à des infos, ça m'interrese aussi.   [...] Je me rappelle d'une expérience faite en première. on avait des enzymes et on devait en faire chauffer certaines (à 60°C puis 100°C je crois) et congeler d'autres. Ensuite on vérifiait si elles conservaient leur activité sur un substrat. On faisait ça en analysant leur produit par chromato sur couche mince (CCM pour les érudits ) Et le résulatat était que celles qui avaient été congelée retrouvaient leur activité enzymatique, alors que les autres étaient définitivement dénaturées.  [...]