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[Biologie Moléculaire] Gamme et témoin BSA

Afin d'étudier l'activité d'une enzyme, nous commençons par le dosage des protéines présentent dans nos échantillons (je m'explique, notre enzyme est extrait de venin de guêpes, afin de pouvoir avoir la même quantité de protéines dans chacun de nos échantillons on réalise un dosage).  [...] Merci. J'ai vérifié et on utilise bien la BSA comme témoin car elle n'a pas d'activité enzymatique, cela nous permet donc de vérifier que l'activité mesurée est bien du à l'ajout de l'enzyme et non à l'ajout de protéines.  [...]

[Biochimie] Plusieurs questions sur les chromatographies échangeuses d'ions et d'affinité

Lors d'une question. les protéines B sont plus petites que l'enzyme on a répondu vrai car les protéines B se situent APRES l'activité enzymatique.  [...] Je te remercie de m'avoir répondu..En fait,j'ai eu TD de biochimie aujourd'hui du coup j'ai posé mes questions,et tu as confirmé les réponses que j'ai reçu...Pour le Nacl en chromatographie d'affinité.comme le substrat(si on veut éluer une protéine enzymatique)ou plus généralement la molécule située sur la résine en phase fixe,se fixe à la protéine à éluer par liaison faible,le NaCl peut perturber ces liaisons en se fixant sur la résine(par compétitivité) et permettant ainsi l'évacuation des protéines à éluer.  [...]

[Biochimie] le role des protéines kinase a sur la glycolyse et la contraction musculaire

Les protéines kinases sont des protéines qui agence un groupement phosphate à un composé. Les fonctions des protéines et des enzymes sont principalement régulées jsutement par phosphorylation. une phosphorylation peut augmenter ou diminuer l'activité catalytique d'une enzyme, stimuler ou inhiber un canal transmembranaire, etc.  [...] Au niveau du foie et du muscle squelettique, l'AMPc augmente la dégradation du glycogène (glycogénolyse) via la PKA en augmentant l'activité de la glycogène phosphorylase. Lors d'un effort, le muscle va avoir besoin de plus d'énergie par unité de temps. il doit donc puiser dans ses ressources énergétiques, et ce processus s'opère notamment par la dégradation du glycogène, l'augmentation de substrats disponibles et de l'activité des enzymes de la glycolyse, etc.  [...]

proteinesdans le culot ou le surnageant

je prend un morceau de foie de poids = 35 mg, je le broie avec un tampon tris contenant le substrat de l'enzyme que je veux doser son activité. Le dosage d'activité se fait par une méthode colorimétrique.  [...] Si votre tampon initial ne contient que du tris, en principe certaines des protéines seront solubles, d'autres pas et se retrouveront donc dans le culot. Une protéine soluble n'a malheureusement aucune raison de précipiter si elle est en solution, même a haute vitesse.  [...]

[Biochimie] facteur de purif et rendement

L'activité totale de l'enzyme est mesurée dans la totalité de l'échantillon afin de savoir quelle quantité d'enzyme fonctionnelle on a avant et après la purif.  [...] L'activité spécifique, c'est l'activité enzymatique par mg de protéines. C'est donc assimilable à une concentration d'activité enzymatique. Au final, rien de bien différent avec l'exemple de la vitamine C énoncé par Mrikzik. Mais étant en présence d'une enzyme, on raisonne en terme d'activité et non de quantité d'enzyme.  [...]

determination de l'activité xanthine oxydase dans le foie

en utilisant les Absorbance spécifique à l'acide urique produite pendant les 10mn de réaction comment calculer l'activité spécifique de cette protéine en nmol d'acide urique/min mg de proteine.  [...] L'activité spécifique de ta protéine qui est une enzyme correspond aux micromoles de produits apparu par minute et par mg de protéines de départ U/mg.  [...]

La mesure de l’activité enzymatique par spectrophotométrie et sa relation avec l’NAD

Si par exemple, dans une réaction, l'un des produits absorbe dans l'UV à 280 (comme toutes les protéines ) mais on a aussi un conezyme NAD impliqué dans la réaction et qui absorbe à 280 nm et à 340 nm aussi, alors lequel des deux serait utilisé pour l'étude de l'activité de cette enzyme par spectrophotométrie Pourquoi.  [...] Si par exemple, dans une réaction, l'un des produits absorbe dans l'UV à 280 (comme toutes les protéines ) mais on a aussi un conezyme NAD impliqué dans la réaction et qui absorbe à 280 nm et à 340 nm aussi, alors lequel des deux serait utilisé pour l'étude de l'activité de cette enzyme par spectrophotométrie.  [...]

fonctionnement noradrénaline/coeur

Cette fixation va provoquer une activation d'une protéine G couplée à ce récepteur (les récepteurs adrénergiques étant des récepteurs couplés à des protéines G) et ensuite cela active l'activité d'une enzyme appelée adénylate cyclase qui produit de l'AMPc.  [...] Donc finalement l'activité électrique précède de quelques millisecondes la contraction mécanique (comme toujours normal), et comme le point de départ se situe en haut du coeur avec le noeud sinusal (oreillette droite) et que ça finit en bas (à l'apex avec le réseau de Purkinje qui remonte ensuite encore une fois vers les ventricules) alors tous les cardiomyocytes ne se contractent pas en même temps, mais avec un très léger décalage dans le temps (négligeable à notre échelle).  [...]

Respiration cellulaire

Ok, merci pour tes réponses. Par exemple l'anoxie/hypoxie (manque d'oxygène au niveau d'un tissus) empêche de produire de l'ATP et donc l'activité cellulaire. Si je prends l'exemple de la synthèse des protéines, si je comprends bien, sans ATP, pas de synthèse de protéines (car pas d'activité cellulaire).  [...] Dans le cas de la communication cellulaire, on peut citer les processus de phosphorylation. L'ATP est hydrolysé, et le phosphate libéré est greffé sur un acide aminé, une serine par exemple. La phosphorylation constitue un signal qui va moduler l'activité de la protéine (si c'est une enzyme) ou la reconnaissance d'autres protéines (si ce n'est pas une enzyme), ou même les deux.  [...]

[Biochimie] Activité spécifique enzymatique

Donc l'activité de l'enzyme est de 0,48 UIE pour 1ml (et 1,44 UIE pour 3ml je suis pas sûre).  [...] Comment fait-on pour calculer l'activité spécifique sachant que le flacon d'enzyme n'est pas pur, il contient 9,92mg de protéines totales en poudre dissoute dans 5ml de tampon et diluées au 1/281°.  [...]