• Forum - Activite enzymatique, Manipulations, Résultats, Mesure

[Biochimie] Activité enzymatique

J'ai eu un TP sur l'activité enzymatique de la phosphatase alcaline. Il y a eu plusieurs manipulations (avec et sans inhibiteur), et avec les résultats d'absorbance qu'on a mesuré, on doit déterminer le Km et le Vmax à partir de différentes méthodes de linéarisation (Lineweaver & Burk, Eadie & Hofstee et Hanes).  [...] Focalisons-nous par exemple sur la méthode de Lineweaver & Burk (ordonnée en min/dA et abscisse en 1/millimolaire) pour une réaction sans inhibiteur.   [...]

[Microbiologie] Validation de méthode de dénombrements

C'est une expérimentation où on s'attend à un résultat négatif - par exemple pour déduire l'absorption du milieu d'une mesure optique, ou vérifier le comportement standard d'un sujet en dehors des facteurs expérimentés, ou une non contamination lors des manipulations, etc.  [...] Un témoin positif vérifie que pour une manipulation donnée, on a un changement. Donc que la manipulation s'est déroulée correctement.  [...]

[biochimie] activité spécifique d'un enzyme selon la concentration

Si tu as 50% de l'activité spécifique tu as donc 50% des enzymes qui t'intéresse dans l'échantillon et 50% d'enzymes que tu aimerais t'en débarassser. Le but étant par exemple de mesurer l'indice de purification d'une technique ou tout simplement vérifier qu'on a un échantillon de protéines qui est le plus pur possible pour divers manipulations,études.  [...] Tu as raison. l'activité spécifique étant une activité exprimée par mg de protéines généralement. donc pour un même extrait enzymatique, l'expression de l'activité spécifique ne changera pas puisque l'activité augmente de manière proportionnelle à la quantité d'enzyme et que c'est un rapport.  [...]

[L1 BIO] TP Biologie moléculaire

Dans le tp on nous donne un plasmide recombinant,un avec une séquence d'ADN qu'on appelle Dsred,l'autre GFP.Le but est de le différencier par différent moyen PCR,digestion enzymatique et électrophorèse.  [...] Puis après on décide de faire une carte de restriction,en faisant une digestion enzymatique par l'enzyme de restriction xho1,cette enzyme se trouve de base dans le plasmide recombinant et aussi dans la séquence de l'ADN de la GFP mais pas dans celui de la Dsred.  [...]

Ostéopathie vs. kinésithérapie?

Des résultats favorables ont été constatés de façon empirique sur certaines douleurs rachidiennes par diverses techniques manuelles et en particulier par les manipulations.  [...] J'imagine que les accidents sont rares, ce qui expliquerait que les autorités laissent faire, même si on peut s'étonner que les kiné ne disent rien, alors qu'eux sont astreints à une formation réglementée là où, vu l'hétérogénéité des formations actuelles, n'importe qui peut suivre un cursus d'ostéo. On se croirait en psychanalyse.   [...]

[Microbiologie] interprétation svvp

après avoir fait un dénombrement sur les 2 milieux solide et liquide de 5 biotopes. lait pasteurisé (L.P). lait cru (L.C). sol. l'eau de puit (E.P) et l'eau de robinet (E.R) voilà les résultats.  [...] s'il vous plait je veux une interprétation de ces résultats, sachant que les manipulations sont faite par des étudiantes donc il y a la possibilité d'avoirs des erreurs.  [...]

[Biochimie] electrphorese

bonsoir, je vais réaliser un profil protéomique des tumeurs cérébrales( etudes comparatives entre sujets sains et malades), mais je bloque sur le protocol a suivre,notament sur les doses a employé dans la preparation de l'electrophorése SDS-page(gels acrylamides et bis acrylamide, TEMED, Tris,persulfate d'ammonium,dose du tampon ),et celles du dosage par la methodes Bradford, S.   [...] l'utilisation des termes sds-page protocol sur google donne pas mal de résultats, il s'agit de manipulations très basiques, il existe des centaines de sites proposant des protocoles.  [...]

[éthique] animaux:"faits pour etre mangés"?

Dans cette mesure, on peut dire qu'il s'est approprié - en les domestiquant - des animaux qui sont dès lors destinés à être mangés. En ce sens, les animaux de ferme ou d'élevage industrielle sont faits (je veux dire élevés, et éventuellement transformé par croisement, sélection artificielle, procédés zootechniques et manipulations génétiques) pour être mangés.  [...] Le végétarisme est donc un choix culturel plus qu'une retrouvaille avec un supposé instinct alimentaire. Cela peut être il est vrai un choix rationnel, sur le plan de l'hygiène alimentaire et de l'écologie pour autant que l'on prenne la précaution d'équilibrer ses menus de manière a assurer l'apport adéquat en acides aminés essentiels (que nous ne pouvons pas synthétiser et qui sont inégalement répartis dans les aliments végétaux) en pratique, associer légumineuses - dont le soja - et céréales.   [...]

[Génétique] PCR ou RT-PCR - Page 2

Et Avec vos réponses je pense que je vais opter pour la RT-PCR, parceque comme vous me l'avez précisé la PCR toute seule ne va pas prouver que le gène est actif (si tjs gène il y a), à la base du projet son activité devait être prouvée par d'autre manips mais en fin de compte si les 2 techniques aux niveaux financiers ne sont pas fort différentes, et que tout compte fait les manipulations sont en générales toutes les deux assez efficaces, les informations de la RT-PCR seront complémentaires et toujours la bienvenue.  [...] Mais c'est vrai que faire d'abord une PCR pour savoir si le gène existe et puis confirmer l'activité du gène sont des informations complémentaires.  [...]

4 °c ???

Lorsqu'on fait une internalisation d'un pathogène ou tout autre substance chimique dont on veut suivre la cinétique de déplacement dans une cellule, le fait de mettre la cellule à 4°C interrompt toute mobilité vésiculaires ainsi que tout activité enzymatique et autre. Ta cellule est en dormance ou survie.  [...] je pense que la raison principale des manipulations de biochimie à 4°C est qu'à cette température les réactions enzymatiques sont inhibées (par exemple les enzymes cataboliques). ça permet donc de figer les réactions biologiques.  [...]