• Forum - Activite enzymatique, Conditions, Réaction

[Biochimie] réaction enzymatique

Quelles sont les conditions initiales pour qu'une réaction enzymatique est lieu.  [...] Bon substrat, avec la bonne enzyme (spécificité de substrat), avec de bonnes conditions (température, pH). Peu importe qu'il y ait plus ou moins de substrat que d'enzymes, après ça va tout seul, c'est ce qui fait la beauté de la chose d'ailleurs.  [...]

[Biochimie] Dtt

Bonjour, à quoi sert le DTT lorsqu'on mesure l'activité d'une réaction enzymatique.  [...] Ce que je connais du DTT c'est qu'il permet de stabiliser les protéines possédantes des groupements soufrés, son pouvoir réducteur sur les thiols en fait un réactif très utilisé en biochimie pour empêcher l'oxydation des cystéines dans les protéines.  [...]

[Biochimie] Activité enzymatique

dans un QCM on avais une phrase tel que. L'activité enzymatique se mesure en fonction de la vitesse de la réaction.  [...] Car le complexe enzyme substrat est saturable donc à un moment il y a une Vmax.   [...]

[Biochimie] préparation d'une gamme etalon

En faite je dose une activité enzymatique avec un réactionnel composé de 125 µl de tampon, 50 µl de solution enzymatique et 75 µl de substrat pNP-glycoside.  [...] Le milieu réactionnel est incubé à 37°C pendant 10 min. La réaction est arrêtée par ajout de 2 ml de carbonate de sodium (2 %, p/v). L'activité enzymatique se manifeste par l'apparition d'une coloration jaune caractéristique du paranitrophénol (pNP) libéré dans le milieu.  [...]

Histoenzymologie

Bonjour j'aimerais savoir pourquoi la phrase. L'histoenzymologie permet de détecter des protéines ayant incorporé un acide aminé radioactif est fausse.   [...] Parce que l'histoenzymologie permet la mise en évidence d'une activité enzymatique par l'intermédiaire de la visualisation d'une réaction colorée, directement ou indirectement, au sein de coupes tissulaires (pas de protéines radioactives dans l'histoire).  [...]

[Biochimie] Questions à propos de l'activité enzymatique (1èreS)

Bonsoir, j'aurais besoin de votre aide sur certaine points concernant le second cours de biologie en 1èreS. L'activité enzymatique, voici mes questions.  [...] La perte d'activité enzymatique par dénaturation est généralement irréversible, dans les conditions de laboratoire du moins. Cette difficulté à se renaturer n'est pas forcément liée à une nécessité d'intervention des chaperones.  [...]

[Biochimie] Extraction d'enzymes musculaires

Dans ta manip enzymatique, étant donné que l'enzyme est bien connue, as-tu mis un témoin positif de la réaction enzymatique = ton milieu réactionnel avec la malate déshydrogenase recombinante Car tes extraits sont peut-être excellents mais les conditions réactionnelles mauvaises (provenant des réactifs ou du protocole).  [...] Cela coûte peut-être cher mais il n'y a pas meilleur moyen pour contrôler que le protocole et les réactifs sont bons pour mesurer cette activité enzymatique. Tâtonner et refaire plusieurs fois un protocole qui ne marche pas peu faire perdre au labo plus d'argent que ce qu'il en aurait été si tous les bons tests avaient été faits au début.  [...]

calcul???

j'ai une manip estimation de l'activité enzymatique. j'ai vu sur un article qu'il faut broyer 1g de feuille avec 5ml du tampon phosphate 50mM (pH7). après une fois qu'on aura preparé l'extrait enzy, l'estimation de l'enzyme SOD se fait selon la reaction suivante.  [...] les questions sont les suivantes. comment préparer les tampons phosphate sachant qu'ils n'ont pas préciser quel produit utilisé (Na2hPO4 ou KH2PO4...) est ce que je pourrait le préparer avec n'importe quel produit je prépare chaque solution a part avec son pH.   [...]

[Biochimie] GPX, GSH : quelle différence?

Des dosages biochimiques ont été réalisés et il est dit que l'activité de la glutathion peroxydase a été calculée par la diminution de taux de GSH réduit par rapport à la réaction non enzymatique blanc. Elle a été exprimée en micromol de GSH oxydé/min/mg de protéines.  [...] GSH est l'abréviation généralement utilisée pour le glutathion sous forme réduite (G pour glutathion et SH pour le groupe sulfhydryle de la molécule). Par opposition, tu pourras trouver l'abréviation GSSG qui correspond à la forme oxydée du glutathion (deux molécules de GSH reliées par un pont disulfure).   [...]

[Biologie Moléculaire] électrophorèse des enzymes.

Ton zymogramme te montre le resultat d'une migration selon selon le point isoelectrique des tes enzymes et non leur poids moleculaire. Pour reveler tes enzymes, tu as peut etre ajoute un compose qui provoque la reaction enzymatique choisie, du coup, tu peux quantifier grossierement l'activite de tes enzymes par la meme occasion.  [...] Lorsque tu as differentes taches sur la meme piste, cela veut dire que tes differentes enzymes ont un point isoelectrique different, et plus la tache est grosse, plus tu avais d'enzymes potentiellement actives au moment de ton extraction.  [...]