• Forum - Activite enzymatique, Concentration, Protéine

[Biochimie] Extraction proteines de champignon

ben... tout dépend de ta protéine, recombinante ou pas, substrat potentiel d'une enzyme, son pHi, sa concentration, son activité enzymatique propre... et ca dépend aussi de ton champignon de départ. il y des dizaines de protocoles complètement différents selon tous ces paramètres.  [...] salut Josquin, oulala c'est vrais je n'ai pas précisé, en fait j'ai une quinzaine de souche à caractériser, pour cela je dois faire une extraction des protéines à partir de sclérotes (structures de conservation du champignon. petite masses noirs 2 à 5mm de diamètre), je dois doser la concentration des protéine, et après électrophorèse, je colore avec différents réactifs selon la nature de la protéine.  [...]

[Divers] Aide sur proteine enzymatique

Tout d'abord je dois faire un schéma synthétique de la biosynthese d'une proteine enzymatique. Apres je dois présenter les facteurs susceptibles d'en modifier l'activité.  [...] Les facteurs suseptible de modifié l'activité d'une proteine enzymatique sont trés nombreux mais je pense qu'il faut que tu reflechisses au concentration de substrat present dans le milieu.  [...]

[Biochimie] courbe chromatographique

ma question pourrait paraîtr bête mais en fait j'aurai aimé savoir comment lire une courbe chromatographique Je veu dir surtout par là que à quoi correspond réellement la partie activité enzymatique spécifique et quel rôle joue la courbe du profil du gradient.  [...] La courbe activité enzymatique spécifique est la courbe obtenue en divisant l'activité/ml par la concentration de protéine en mg/ml. Plus l'activité spécifique est élevée, plus l'enzyme est pure. Cette courbe est donc un bon moyen de visualiser dans quelles fractions se trouve l'enzyme la plus pure.  [...]

activité spécifique

L'activité Spécifique enzymatique (AS) correspond aux micromoles de produits apparu, par minute et par mg de protéines. On l'exprime aussi sous la forme. U/mg.  [...] Il est possible de la calculer à partir de l'Activité Enzymatique (micromoles de protuits formés par minutes et par mL de protéines, soit U/mL) déterminée de manière expérimentale et de la concentration en protéine en solution (mg/mL).  [...]

[HELP]biochimie enzyme

La concentration d'activité catalytique Ccat correspond à l'activité enzymatique par litre de préparation enzymatique, elle s'exprime en U.L -1.  [...] Dans la première expression de Ccat, tu as une variation de concentration (C) et dans la deuxième tu as une variation d'absorbance (A).  [...]

[Biochimie] Extraction d'enzymes musculaires

Au niveau de la quantité de protéine extraite, pourquoi veux-tu une concentration de protéines supérieure à 2 µg/µl sans avoir (enfin je pense vu la tournure du message) mesurer l'activité enzymatique voulue Personnellement je trouve cette concentration satisfaisante.  [...] Le mieux reste que tu testes ton activité enzymatique dans les extraits que tu as. S'il n'y a rien de détectable avec 2 µg/µl de protéines, c'est à partir de là qu'il faudra penser à mettre au point la manip.  [...]

[Biochimie] Activité enzymatique

La précipitation au sulfate d'ammunium permet la concentration de l'activité enzymatique.Cependant, si on passe d'un volumé de filtrat de culture de 50 ml à un précipité de 5ml, on concentre 10 fois notre échantillon. Normalement on doit obtenir une activité enzymatique multiplié par 10 ( en théorie).  [...] L'activité enzymatique n'est pas une quantité. L'activité enzymatique est donnée par une enzyme. Ce que vous faites varier c'est la concentration de l'enzyme.  [...]

determination de l'activité xanthine oxydase dans le foie

L'activité spécifique de ta protéine qui est une enzyme correspond aux micromoles de produits apparu par minute et par mg de protéines de départ U/mg.  [...] pour calculer la concentration de l'acide urique produite par minute on divisera l'absorbance par le coefficient d'extinction molaire de l'acide urique divisé par 10mn. donc on aura la concentration en mmolaire/l mn multiplié par le volume de l'échantillon.  [...]

[Biochimie] élution protéine

Pour résoudre les deux premiers points, une augmentation de la force ionique peut tendre vers un profil d'élution à un seul pic. Cependant à gérer avec prudence puisqu'une concentration en sel trop forte peut dénaturer l'enzyme, ou inhiber son activité enzymatique ce qui entrave le but recherché.  [...] - Le pic contaminant est celui qui sort le plus tard. perte de protéines habituellement associées à ta protéine (peu probable), perte de la structure quaternaire de la protéine (tout ce qui concerne l'association et l'organisation en multimères) qui ne provoque pas de perte d'activité enzymatique.  [...]

[Biochimie] TP activité de la phosphoénol pyruvate carboxylase, calcul vitesse initiale

J'ai calculé au préalable avec une gamme étalon de la BSA la concentration protéique pour chacune des deux espèces végétales mais je comprend pas ce qu'il faut faire pour calculer l'activité spécifique de la PEPcase.  [...] Ayant calculé le nombre de mole de PEPcarboxylé par min et ayant calculer la concentration protéique (extrait enzymatique) pour chaque espèce végétale, pour avoir l'activité spécifique de la PEPcarboxylase je dois juste diviser le nombre de mole de PEP caboxylé par min PAR la masse des extraits protéiques.  [...]