• Dossiers - Enzyme, Membrane plasmique, Activité

Conclusion | Dossier

Ainsi, nous sommes capables de montrer une action directe sur l'enzyme par une étude de liaison, nous pouvons déterminer si le composé possède une action préférentielle pour une des isoformes présente dans nos cellules en visualisant la translocation de cette enzyme du cytoplasme vers la membrane plasmique au cours de son activation et enfin une activité au niveau cellulaire peut être montrée en déterminant l'activité antioxydante sur les granulocytes neutrophiles.  [...] Ensuite, nous avons cherché à voir si d'autres composés donnés comme inhibiteurs de la Rho-kinase (la HA-1077 et le Y-32885) pouvaient avoir une action sur l'activité de la protéine kinase C. Il s'est avéré que les molécules possèdent une activité antioxydante due à une inhibition de l'enzyme étudiée.  [...]

Résultats | Dossier

Comme nous l'avons déjà vu, les activateurs que nous avons choisis d'utiliser sont le PMA et le fMLP. Il a fallu dans un premier temps définir les conditions dans lesquelles la protéine kinase C est activée. Pour visualiser cette activité, nous avons cherché à quelle concentration et quel temps d'activation, avec chacun des activateurs, les différentes isoformes de la PKC étaient transloquées vers la membrane plasmique (fig.  [...] Afin de confirmer l'action inhibitrice du CED-28 sur la protéine kinase C et une absence d'activité des trois autres molécules sur l'enzyme, nous avons cherché à voir quelle influence pouvait avoir ces composés sur la tanslocation de la PKC du cytoplasme vers la membrane plasmique.  [...]

Généralités sur la protéine Kinase C | Dossier

Il a été remarqué, par des études de cristallographie, que leurs liaisons ne produisent pas de changement conformationnel significatif de la protéine. Pourtant, la liaison aux esters de phorbol permet une modification de la surface hydrophobe de cette région C1, autorisant une liaison avec la cible membranaire au cours de la translocation de l'enzyme du cytoplasme vers la membrane plasmique permettant son activation (fig. 3. 5 et 6).  [...] L'activation de la protéine kinase C nécessite la translocation de l'enzyme du cytoplasme vers la membrane plasmique où le diacylglycérol peut se lier à la région C1. Par ailleurs, il existe également une région C2 possédant une affinité pour les ions calcium.  [...]

Discussion | Dossier

Nous avons donc été obligés de développer une stratégie supplémentaire pour attribuer la diminution de la flambée respiratoire à une inhibition de la protéine kinase C. Comme nous l'avons déjà démontré, la protéine kinase C doit être transloquée vers la membrane plasmique afin d'acquérir son activité enzymatique.  [...] Dans le cas où une faible concentration est additionnée au milieu, la protéine kinase C migre normalement vers la membrane plasmique que nous utilisions le PMA ou le fMLP pour activer les granulocytes neutrophiles. Au contraire, lorsqu'il s'agit d'une concentration de 1 mM, nous avons observé une absence totale de déplacement de l'enzyme à l'intérieur de la cellule.  [...]

Schémas d'activation de la protéine Kinase C | Dossier

10). Il faut néanmoins prendre en compte la complexité du réseau des signaux intracellulaires et voir ainsi que ces trois voies sont dépendantes les unes des autres (fig.11). Quelle que soit l'origine de la stimulation de la [protéine kinase C ], il est à remarquer qu'au cours de son activation, cette enzyme migre du cytoplasme vers la membrane plasmique.  [...] Ainsi, en réponse à son activation, la [protéine kinase C ] est transloquée vers la membrane plasmique. A ce niveau, plusieurs protéines ont été caractérisées comme protéine d'ancrage, parmi lesquelles RACK (receptor for activited C kinase). elle a une masse moléculaire allant de 30 à 36 kDa.  [...]

La PKC dans la flambée respiratoire chez le granulocyte neutrophile | Dossier

La NADPH oxydase se présente sous la forme d'un complexe enzymatique qui est localisé au niveau de la membrane plasmique. Elle est constituée d'une flavocytochrome b qui est un hétérodimère formé par une sous unité de 91 kDa (gp91-phox) et d'une sous unité de 22 kDa (p22-phox).  [...] Pour que l'activité enzymatique puisse exister, deux autres protéines cytoplasmiques interviennent. la p47-phox et la p67-phox. Dans des cellules non stimulées, ces protéines sont localisées dans le cytosol. lors de l'activation, elles sont transloquées vers la membrane plasmique où elles s'associent avec gp91-phox et p22-phox (Deleo F.R. et Quinn M.T., 1996).  [...]

Biologie de la crise épileptique | Dossier

Concentrations ioniques au niveau de la membrane plasmique du neurone. Les gradients de concentration des ions sodium (Na+), potassium (K+) et chlorure (Cl-) conduisent à une polarisation de la membrane. Lorsque le neurone est activé, une onde de dépolarisation parcourt le neurone, grâce à des échanges ioniques au niveau de canaux membranaires. MC Jacquier.  [...] Au repos, les concentrations en ions de part et d'autre de la membrane plasmique du neurone sont stables. La différence de charges de chaque côté de la membrane conduit à l'existence d'un potentiel de membrane (ou potentiel de repos) de l'ordre de -70 mV. Le passage des ions n'est possible qu'au niveau de protéines-canaux transmembranaires.  [...]

Les sensations du fumeur | Dossier

Les récepteurs nicotiniques de l' acétylcholine sont présents dans de nombreux tissus de l'organisme. Les récepteurs nicotiniques constituent des canaux ioniques présents dans la membrane plasmique des cellules. Ils peuvent exister sous différents états structuraux interconvertibles.  [...] D'une part, ces mouvements de cations vont provoquer une dépolarisation de la membrane plasmique, qui va se traduire par une excitation, en particulier dans les neurones, mais aussi par l'activation d'autres canaux ioniques contrôlés par le voltage.  [...]

Discussion | Dossier

Les tests utilisant les enzymes purifiées à partir de cellules transfectées ou non transformées ne considèrent pas les problèmes existants par rapport au passage de la membrane plasmique par des molécules (Grossman C.J. et al., 1995, Meade S.A. et al., 1993, Mitchell J.A. et al.,1993).  [...] Par contre, ces composés n'interagissent pas avec la p38 kinase et la protéine JNK, elles aussi impliquées dans l'induction de l'expression de la COX-2 (Barry O.P. et al., 1999). A la vue de ces résultats et de ces remarques, il nous a semblé inopportun de continuer à chercher un moyen d'inhiber l'expression de la COX-2, ainsi pour limiter la production de prostanoïdes par cette enzyme conduisant à l'inflammation cellulaire, il nous faudra donc diminuer son activité enzymatique.  [...]

Objectifs de l'étude | Dossier

Le fMLP est un peptide bactérien N-formylé mimant un ligand naturel sur certains récepteurs membranaires. La PKC peut être activée par l'intermédiaire de la phospholipase C, mais d'autres enzymes peuvent être stimulées. Parmi celles-ci, il est possible de noter la protéine kinase A ou les tyrosines kinases, la plupart de ces enzymes sont capables de réguler de façon plus ou moins directe l'activité de la NADPH oxydase.  [...] Nous avons vu que lors de son activation, la protéine kinase C est transloquée vers la membrane plasmique. Pour visualiser ce phénomène, une technique de western blot est employée. Ceci permettra de confirmer que c'est bien la protéine kinase C qui est impliquée dans les processus étudiés.  [...]