• Dossiers - Activité, Cellules, Molécules

Etude de la réaction inflammatoire, Partie 1 | Dossier

Notre but a été de mettre au point un modèle permettant d'étudier des molécules inhibitrices spécifiques de la cyclooxygénase -2 versus cyclooxygénase -1. Il a fallu choisir les cellules et les conditions d'activation pour visualiser de façon différentielle l'activité de l'une et l'autre des isoenzymes afin d'avoir un modèle cohérent et qui tient compte au maximum des propriétés biologiques de chacune des isoformes.  [...] Après avoir validé le modèle par des molécules de référence, nous avons pu tester des molécules originales augmentant la sélectivité envers la COX-2.  [...]

Des cellules souches embryonnaires pour les maladies monogéniques | Dossier

3. le laboratoire de modélisation pathologique est consacré à l'identification des mécanismes pathologiques et de traitements pharmacologiques adaptés à travers l'utilisation de lignées de cellules souches porteuses d'une mutation pathogène. Cette activité repose sur l'identification de biomarqueurs associés à la mutation et le criblage à haut débit de molécules susceptibles de modifier leur expression.  [...] Fin 2006, un premier bilan scientifique de l'activité d'I-Stem sera dressé à partir duquel il sera envisagé de créer un véritable institut consacré au développement des approches thérapeutiques liées aux cellules souches embryonnaires humaines pour l'ensemble des maladies monogéniques.  [...]

Comment les lymphocytes T sont-ils maintenus en repos ? | Dossier

Les FOXO, ainsi exclus du noyau, ne peuvent plus alors exercer leur activité transcriptionnelle. Ceci aura pour conséquences d'entraîner une baisse de production des ARN messagers codant pour différentes protéines dont l'accumulation dans les cellules au repos bloque le cycle cellulaire (comme p27) ou favorise la mort cellulaire (comme Bim).  [...] mais il suffit de rétablir cette activité en introduisant dans les cellules tumorales des formes constitutivement actives de ces molécules (c'est à dire devenues insensibles à l'effet inhibiteur de la voie de la PI3-kinase) pour observer un arrêt spectaculaire de leur multiplication, puis leur mort.  [...]

Matériels et méthodes | Dossier

La cytotoxicité de la molécule à tester est évaluée par le dosage de l'activité enzymatique de la lactate déshydrogénase (LDH) du surnageant cellulaire d'une suspension de granulocytes neutrophiles ou de lymphocytes, monocytes (5.10 6 cellules/ml) incubée à 37°C avec l'inhibiteur à différentes concentrations.  [...] Les molécules originales sont insolubles dans l'eau, dans le tampon (Hanks'HEPES) utilisé pour l'incubation des cellules et dans les solvants organiques compatibles avec une non toxicité vis à vis des monocytes, lymphocytes. Les composés sont tout d'abord dissout dans une substance solubilisante.  [...]

Conclusion | Dossier

Ensuite, nous avons cherché à voir si d'autres composés donnés comme inhibiteurs de la Rho-kinase (la HA-1077 et le Y-32885) pouvaient avoir une action sur l'activité de la protéine kinase C. Il s'est avéré que les molécules possèdent une activité antioxydante due à une inhibition de l'enzyme étudiée.  [...] Les modèles habituellement publiés utilisent des conditions et types cellulaires ne prenant pas en compte la réalité physiologique de la cellule. Nous avons donc défini le choix cellulaire, les conditions d'activation et les éléments indispensables pour reproduire le plus fidèlement possible le milieu biologique de départ, afin d'étudier l'influence des molécules originales sur l'activité enzymatique de chacune des isoformes de la cyclooxygénase.  [...]

Résultats | Dossier

fig. 86. Activité enzymatique de COX-1 et COX-2 en fonction des molécules originales testées (n=3, * significativement différent par rappport à la référence pour p.  [...] Donc, si nous constatons par la suite une inhibition de la production de TxB 2, nous pourrons affirmer que cette diminution est due à une inhibition de l'activité enzymatique de la cyclooxygénase et non pas à un effet type corticoïde des molécules originales.  [...]

Des clones embryonnaires venus d'Asie | Dossier

En mars 2004, la revue Nature publia un éditorial sur l'activité de la Chine en matière de recherche sur l' embryon, transfert nucléaire, isolement et caractérisation de cellules souches. Intitulé An Embryonic nation, cet article insiste sur les atouts de la Chine.  [...] En résumé. la publication des professeurs Hwang et Moon annonce seulement que l'autoclonage reproductif, c'est-à-dire la duplication d'une jeune femme en période d'activité sexuelle, pourrait être moins difficile qu'on ne le pensait. En revanche, l'isolement par clonage de lignées de cellules souches embryonnaires à usage thérapeutique se heurte encore à des difficultés non surmontées.  [...]

Matériels et méthodes | Dossier

La lactate déshydrogénase est une enzyme exclusivement cytoplasmique et relativement stable. L'augmentation de l'activité de cette enzyme dans le surnageant des cellules permet de détecter une altération de la perméabilité membranaire.  [...] La cytotoxicité de la molécule à tester est évaluée par le dosage de l'activité enzymatique de la lactate déshydrogénase (LDH) du surnageant cellulaire d'une suspension de granulocytes neutrophiles (5.10 6 GrN/ml) incubée à 37°C avec l'inhibiteur à différentes concentrations.  [...]

Développement du modèle | Dossier

Le modèle a été développé dans le but de tester des molécules originales provenant de l'équipe du Professeur Daniel Lesieur de l'Institut de Chimie Pharmaceutique Albert Lespagnol (ICPAL). Le cahier des charges pour élaborer ce modèle a été le suivant. utiliser un modèle cellulaire afin de prendre en compte le transport des molécules testées à travers les membranes, un système cohérent pour la détermination des CI50 pour la COX-1 et pour la COX-2 c'est à dire le même type de matériel cellulaire et des conditions d'activation permettant de stimuler spécifiquement les deux enzymes.  [...] En incubant les cellules avec le calcium ionophore A23187 (CaIo), cela permet d'optimiser l'activité enzymatique de la COX-1 (Kuehl F.A. et Egan R.W., 1980).  [...]

Sélectivité de molécules originales | Dossier

Ces prostanoïdes sont le résultat de l'activation de la cascade de l' acide arachidonique par la [cyclooxygénase ]-2, cette enzyme découverte il y a une dizaine d'années est présente au niveau des foyers inflammatoires et elle est responsable de différents états physiologiques et pathologiques.  [...] C'est pourquoi les recherches actuelles visent à synthétiser des molécules ayant un fort potentiel d'inhibition de la [cyclooxygénase ]-2, dans le but de lutter contre les processus liés à l'inflammation, sans influer sur l'activité de la [cyclooxygénase ]-1 et donc de préserver ses propriétés de cytoprotection.  [...]